高效偶聯(lián)：琥珀酰亞胺酯（NHS酯）是用于生物分子標(biāo)記的反應(yīng)基團(tuán)，可與蛋白質(zhì)、抗體、核酸等生物分子中的伯胺（-NH2）反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺鍵。

熒光特性：作為一種紫色激發(fā)（405 nm）的熒光染料，其發(fā)射波長(zhǎng)為551 nm，適用于多參數(shù)分析。

穩(wěn)定性高：形成的共價(jià)鍵與蛋白質(zhì)中的肽鍵一樣穩(wěn)定。 

基礎(chǔ)知識(shí)概述:  

中文名：Pacific Orange 琥珀酰亞胺酯 

英文名：Pacific Orange NHS Ester，Pacific Orange Succinimidyl Ester 

分子式：C26H28N2O6

分子量：456.51 

規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1mg、5mg、10mg 

試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司

相關(guān)應(yīng)用：

1.流式細(xì)胞術(shù)：

用于細(xì)胞表面標(biāo)記和細(xì)胞分選，可與多種抗體或蛋白質(zhì)偶聯(lián)。

例如，用于標(biāo)記死細(xì)胞，以便在流式細(xì)胞儀中區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。

2.熒光顯微鏡成像：

適用于熒光顯微鏡成像，可用于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸的標(biāo)記。

3.生物偶聯(lián)：

通過NHS酯基團(tuán)與生物分子中的伯胺反應(yīng)，用于標(biāo)記和檢測(cè)生物分子。

使用方法：

1.標(biāo)記蛋白質(zhì)或抗體：

溶解試劑：將Pacific Orange Succinimidyl Ester溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中（如PBS），制備工作濃度（通常為1-10 μg/mL）。

反應(yīng)條件：將標(biāo)記物與生物分子混合，在室溫下避光孵育30分鐘至1小時(shí)。

純化：使用凝膠過濾或透析去除未結(jié)合的染料。

2.流式細(xì)胞術(shù)標(biāo)記：

細(xì)胞處理：將細(xì)胞收集并重懸于適當(dāng)?shù)木彌_液中。

染色：將Pacific Orange Succinimidyl Ester稀釋至適當(dāng)濃度（如5 μM），加入細(xì)胞懸液中，室溫孵育15分鐘。

洗滌：用PBS洗滌細(xì)胞，去除未結(jié)合的染料。

檢測(cè)：使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)為405 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為551 nm。

3.熒光顯微鏡成像：

細(xì)胞固定與通透：用4%多聚甲醛固定細(xì)胞，然后用0.1% Triton X-100通透。

染色：將Pacific Orange Succinimidyl Ester稀釋至適當(dāng)濃度（如1-10 μg/mL），加入細(xì)胞中，室溫孵育30分鐘。

洗滌：用PBS洗滌細(xì)胞，去除未結(jié)合的染料。

觀察：使用熒光顯微鏡觀察，激發(fā)波長(zhǎng)為405 nm，發(fā)射波長(zhǎng)為551 nm。

包裝：

質(zhì)量控制：95%+