在使用移液工作站時(shí),為確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性及設(shè)備安全,需注意以下關(guān)鍵事項(xiàng):
1. 設(shè)備準(zhǔn)備與校準(zhǔn)
定期校準(zhǔn):按廠家建議或?qū)嶒?yàn)室標(biāo)準(zhǔn)(如ISO 8655)校準(zhǔn)移液頭,確保精度(如±1%)和重復(fù)性(如CV≤1%)。
環(huán)境控制:在溫度(20 25℃)、濕度(45 65%)穩(wěn)定的環(huán)境中操作,避免氣流干擾(如關(guān)閉通風(fēng)設(shè)備)。
耗材匹配:使用與工作站兼容的吸頭,避免漏液或密封不良(如通過壓力測試驗(yàn)證)。
2. 操作規(guī)范
液體性質(zhì):
高黏度液體(如甘油)需設(shè)置延遲吸液/排液時(shí)間。
揮發(fā)性液體(如乙醇)建議使用低吸附吸頭,縮短操作時(shí)間。
吸液深度:浸入深度為吸頭長度的2 3倍(如1mL吸頭浸入3 5mm),避免過深導(dǎo)致外壁掛液。
排液角度:貼壁排液時(shí)保持10 45°傾斜,確保液體排出。
分液模式:反向吸液(Reverse Pipetting)適用于易產(chǎn)生氣泡的液體(如蛋白溶液)。
3. 污染控制
生物安全:處理生物樣本時(shí)啟用HEPA過濾系統(tǒng),操作后用70%乙醇或10%次氯酸鈉消毒臺(tái)面。
交叉污染:
更換樣品時(shí)使用帶濾芯吸頭。
執(zhí)行“液面跟隨”功能,避免吸頭觸碰管壁殘留。
清潔程序:每周用無絨布清潔傳感器軌道,每月潤滑機(jī)械臂關(guān)節(jié)(使用硅基潤滑劑)。
4. 程序設(shè)置優(yōu)化
預(yù)潤洗:對蛋白類樣品執(zhí)行2 3次預(yù)潤洗,減少吸附損失。
速度調(diào)節(jié):
吸取高黏度液體時(shí),降低速度至50%(如默認(rèn)500μL/s降至250μL/s)。
分裝易起泡液體時(shí)關(guān)閉“混合”功能。
體積限制:避免使用吸頭標(biāo)定容積的10%以下(如1000μL吸頭最小分裝100μL)。
5. 維護(hù)與故障處理
日常檢查:
確認(rèn)廢液瓶容量(如4L廢液瓶剩余≤3L時(shí)清空)。
檢查TipCon傳感器是否對齊(偏差≤0.5mm)。
錯(cuò)誤處理:
液面檢測失敗:檢查導(dǎo)電吸頭是否損壞或液體是否導(dǎo)電不足(可添加0.1% Tween 20增強(qiáng)導(dǎo)電性)。
堵針:用0.1mm通針清潔或超聲處理(40kHz,5分鐘)。
記錄維護(hù)日志:記錄每次校準(zhǔn)數(shù)據(jù)(如重量法測得1000μL實(shí)際值為998±2μL)。
6. 安全注意事項(xiàng)
緊急停止:熟悉急停按鈕位置(通常位于正面右下角),測試響應(yīng)時(shí)間(≤0.5秒)。
電氣安全:使用穩(wěn)壓電源(220V±10%),接地電阻<4Ω。
機(jī)械限位:定期檢查Z軸限位開關(guān),防止撞針(建議每月用限位卡尺校驗(yàn))。
7. 數(shù)據(jù)與合規(guī)
審計(jì)追蹤:啟用操作日志功能(如記錄用戶ID、時(shí)間戳、體積參數(shù)),符合GLP/GMP要求。
版本控制:備份液體處理程序(如.DAT文件),標(biāo)注修改日期和操作者。
示例場景:
處理96孔板PCR反應(yīng)體系時(shí),建議:
使用20μL低吸附吸頭
設(shè)置5μL預(yù)分配體積(避免首滴誤差)
分裝后孔間吹吸3次(混合體積為體系10%)
通過嚴(yán)格遵循上述規(guī)范,可顯著降低CV值(如從5%降至2%),并延長設(shè)備壽命(平均故障間隔時(shí)間MTBF≥5000小時(shí))。
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