Lipofectamine™ 2000轉(zhuǎn)染試劑操作要點總結(jié)
Lipofectamine™ 2000轉(zhuǎn)染試劑操作要點總結(jié)
Lipofectamine™ 2000 轉(zhuǎn)染試劑是一種常用的細胞轉(zhuǎn)染試劑,由陽離子脂質(zhì)和中性脂質(zhì)混合而成。其主要作用是幫助外源DNA、RNA或蛋白質(zhì)等分子有效地進入細胞內(nèi),實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)染或蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染。在科研領域,Lipo2000廣泛應用于基因轉(zhuǎn)染和siRNA轉(zhuǎn)染實驗,用于基因表達調(diào)控、基因沉默等研究。此外,它也可用于蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染,將外源蛋白質(zhì)引入細胞內(nèi)進行功能研究。在使用時,需注意根據(jù)不同的細胞類型和待轉(zhuǎn)染分子優(yōu)化濃度和轉(zhuǎn)染時間,避免過高濃度或時間導致的細胞毒性。正確使用Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑可以確保實驗的準確性和可靠性,為細胞生物學和分子生物學研究提供重要支持!那么以下內(nèi)容,我們將為您匯總資深用戶在進行轉(zhuǎn)染操作時的經(jīng)驗,一起來學習下吧~
Lipofectamine™ 2000 轉(zhuǎn)染試劑的保存與運輸:
由于Lipo2000是生物蛋白,存儲與運輸?shù)臏囟葹?/span>4℃,所以就算是同一個批號的Lipo2000,只有在剛出廠分裝時活性才是相同的,但經(jīng)過供應商的保存、運輸(運輸時溫控各不相同),其活性將有細微的變化。
Lipofectamine™ 2000 轉(zhuǎn)染試劑的優(yōu)化:
每管Lipo2000的活性都具有差異,哪怕就算是同一管,使用的時間長了,后期的活性相較于初始使用時也不太一樣,所以在拿到一管新的Lipo2000時,一定要做一下活性優(yōu)化;
如果一直使用Lipo2000做實驗,優(yōu)化的步驟可以簡化:
假設之前轉(zhuǎn)化時每孔一直用4ul Lipo2000,那么優(yōu)化的步驟可以簡化為只用5個孔,每個孔中Lipo2000用量分別為3ul,3.5ul,4ul, 4.5ul, 5ul其他條件不變,看哪個Lipo2000的用量結(jié)果最好,接下來的實驗就選用優(yōu)化的用量。
Lipofectamine™ 2000 轉(zhuǎn)染試劑的使用要點:
1. 使用前將整管的Lipo2000混勻,分裝,最好分成100ul/管;
2. 實驗前,將分裝好的100ul Lipo2000和質(zhì)粒DNA(或RNA)放到實驗臺上室溫平衡,不需要冰上保存;
3. 將Opti-MEM培養(yǎng)基放到水浴鍋中37°C平衡;
4. 按照說明書進行轉(zhuǎn)染,注意控制好每一步操作的時間;
5. Lipo2000的用量并不是越多越好,實際上,Lipo2000一旦加多,毒性會增加,細胞會死亡,轉(zhuǎn)化效率會大幅降低。
綜上所述,Lipofectamine™ 2000 作為高效、常用的轉(zhuǎn)染工具,其成功應用的關鍵在于充分認識其活性特性并實施精細的操作優(yōu)化。深刻理解其活性會因儲存、運輸及使用過程而變化,是新批次試劑到手后必須進行活性優(yōu)化的核心原因。 我們在實操時要遵循經(jīng)驗要點——優(yōu)化用量、規(guī)范分裝、注意平衡、控制時間、警惕毒性——將極大提升實驗的可重復性和成功率。希望以上內(nèi)容能助您在基因表達、功能研究等實驗中更加得心應手,讓 Lipofectamine™ 2000 轉(zhuǎn)染試劑成為您探索細胞奧秘的堅實助力。科學始于嚴謹,成于細節(jié),預祝您的轉(zhuǎn)染實驗順利高效!
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 貨期 |
Lipofectamine™ 2000 轉(zhuǎn)染試劑 | 11668019 | 1.5ml | 現(xiàn)貨 |
柏萊源(天津)生物科技有限公司的優(yōu)勢:
現(xiàn)貨供應:公司庫存充足,可快速發(fā)貨,減少用戶等待時間。
效期保障:嚴格把控產(chǎn)品質(zhì)量,確保試劑效期新鮮,保障實驗結(jié)果的可靠性。
專業(yè)技術支持:提供詳細的實驗方案和技術指導,幫助用戶優(yōu)化實驗條件,提高實驗成功率。
定制化服務:根據(jù)用戶需求,提供個性化的產(chǎn)品和服務解決方案。
售后保障:完善的售后服務體系,及時解決用戶在使用過程中遇到的問題。
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