小鼠 CXC 趨化因子配體 14(CXCL14)是 CXC 趨化因子家族的成員之一,又被稱為 BRAK(B - 細胞趨化因子)或 MIP-2γ(巨噬細胞炎癥蛋白 - 2γ)。其基因定位于小鼠特定的染色體上,編碼的蛋白質(zhì)由特定數(shù)量的氨基酸殘基組成,分子結(jié)構(gòu)中含有典型的 CXC 趨化因子結(jié)構(gòu)域,即兩個半胱氨酸(C)之間隔有一個其他氨基酸(X)。
CXCL14 在小鼠體內(nèi)的組織分布具有一定的特異性,在肝臟、腎臟、肺臟、腸道以及多種免疫器官(如脾臟、淋巴結(jié))中均有表達,其中在某些正常組織中的基礎(chǔ)表達水平相對較高。在生理狀態(tài)下,CXCL14 的表達處于動態(tài)平衡,參與機體的免疫調(diào)節(jié)和生理過程。而在病理狀態(tài)下,如炎癥反應(yīng)、腫瘤發(fā)生、組織損傷等,其表達水平會發(fā)生明顯變化。例如,在腫瘤微環(huán)境中,CXCL14 的表達可能上調(diào)或下調(diào),通過影響免疫細胞的浸潤和腫瘤細胞的生物學行為,參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展,因此成為相關(guān)研究領(lǐng)域的重要指標。
生理功能
CXCL14 在小鼠體內(nèi)具有多種重要的生理功能,主要圍繞免疫調(diào)節(jié)、細胞趨化以及組織穩(wěn)態(tài)維持等方面展開。
首先,強大的趨化作用。CXCL14 能夠特異性地吸引多種免疫細胞,如單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等向其濃度梯度較高的部位遷移。這種趨化作用在機體的免疫防御中至關(guān)重要,當病原體入侵或組織發(fā)生損傷時,CXCL14 被釋放,招募免疫細胞到達炎癥或損傷部位,啟動免疫應(yīng)答,清除病原體并參與組織修復。
其次,參與免疫調(diào)節(jié)。CXCL14 可以調(diào)節(jié)免疫細胞的活性和功能,例如促進巨噬細胞的活化和細胞因子的分泌,增強機體的 innate 免疫(固有免疫)應(yīng)答。同時,它還可能參與 adaptive 免疫(適應(yīng)性免疫)的調(diào)控,影響 T 細胞、B 細胞的增殖、分化和功能,維持免疫系統(tǒng)的平衡。
此外,在組織穩(wěn)態(tài)和修復中發(fā)揮作用。CXCL14 可能參與多種組織的正常生理穩(wěn)態(tài)維持,在組織損傷后,其表達水平的變化可能促進成纖維細胞等細胞的遷移和增殖,加速組織的修復和再生過程。例如,在皮膚損傷愈合過程中,CXCL14 可能通過趨化相關(guān)細胞,促進傷口的愈合。
同時,CXCL14 與腫瘤的發(fā)生發(fā)展存在關(guān)聯(lián)。研究發(fā)現(xiàn),在不同類型的腫瘤中,CXCL14 的作用可能具有雙重性,既可能通過招募免疫細胞抑制腫瘤生長,也可能通過促進腫瘤血管生成、腫瘤細胞遷移等方式促進腫瘤進展,具體作用機制因腫瘤類型和微環(huán)境而異。
檢測原理
小鼠 CXC 趨化因子配體 14(CXCL14)ELISA 試劑盒是基于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理,專門用于定量檢測小鼠樣本(如血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)液、腹腔液等)中 CXCL14 含量的專業(yè)檢測工具。
該試劑盒的檢測原理以抗原與抗體的特異性結(jié)合為核心,具體檢測流程如下:試劑盒中的酶標板預先包被了針對小鼠 CXCL14 的特異性單克隆抗體。當加入待檢測的小鼠樣本時,樣本中的 CXCL14 會與酶標板上包被的抗體發(fā)生特異性結(jié)合,形成抗原 - 抗體復合物,這一過程通常在 37℃下孵育一定時間(如 60 分鐘),以保證結(jié)合充分。
孵育結(jié)束后,進行洗滌步驟(通常洗滌 3-5 次),將未與包被抗體結(jié)合的其他雜質(zhì)、干擾物質(zhì)等清洗去除,避免對后續(xù)檢測步驟產(chǎn)生干擾。接著,向酶標板中加入酶標記的抗小鼠 CXCL14 多克隆抗體(常用的標記酶為辣根過氧化物酶,HRP),該酶標抗體可與已結(jié)合在包被抗體上的 CXCL14 發(fā)生特異性結(jié)合,形成 “包被抗體 - CXCL14 - 酶標抗體” 的夾心結(jié)構(gòu),再次在 37℃下孵育一定時間(如 30-60 分鐘)后,進行洗滌以去除未結(jié)合的酶標抗體。
隨后,加入底物溶液(如 TMB 底物液),酶標抗體上的 HRP 會催化底物發(fā)生氧化還原反應(yīng),生成藍色的產(chǎn)物。顯色反應(yīng)的強度與樣本中 CXCL14 的含量呈正相關(guān),即樣本中 CXCL14 含量越高,顯色反應(yīng)越強烈,藍色越深。
最后,加入終止液(如 2M 硫酸溶液)終止反應(yīng),此時反應(yīng)液的顏色會由藍色變?yōu)辄S色。使用酶標儀在特定波長(一般為 450nm,部分試劑盒可能需要參考 630nm 作為校正波長)下測定各孔的吸光度(OD 值)。根據(jù)試劑盒提供的 CXCL14 標準品(不同濃度梯度)制作標準曲線,將待檢測樣本的 OD 值代入標準曲線,即可計算出樣本中 CXCL14 的具體濃度。
相關(guān)產(chǎn)品
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