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肝素親和柱升級揭秘GB 5009.299-2024食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中乳鐵蛋白的測定
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品貨號 | BAC50020-12 |
產(chǎn)品名稱 | Heparin Immunoaffinity column |
產(chǎn)品描述 | 12mL, 20/Pk |
產(chǎn)品亮點(diǎn)
?至純至簡：100%遵循GB 5009.299-2024前處理步驟，12 mL大體積柱管，無需輔助即可實(shí)現(xiàn)一步上樣，保證流速，減少堵塞，讓標(biāo)準(zhǔn)操作變得更加順暢；
?穩(wěn)收雙高：緩沖液添加回收率＞95%，RSD＜5%；
?艾飛雙行：艾杰爾肝素親和柱+飛諾美Jupiter C4液相色譜柱的黃金搭檔，輕松助力乳鐵蛋白的測定。
產(chǎn)品參數(shù)
?儲(chǔ)存條件：肝素親和柱需在2-8℃條件下儲(chǔ)存，不得冷凍。
?保質(zhì)期：在最佳保存溫度條件下，產(chǎn)品有效期18個(gè)月(蛋白提取試劑有效期6個(gè)月)。
?注意事項(xiàng)：為保證最佳回收率，使用前，肝素親和柱及待檢樣品需于18-25℃回溫。
樣品前處理方法
?稱量：稱取5g（精確至0.01g）巴氏殺菌乳（巴氏奶）試樣于燒杯中，加標(biāo)；
?提取：加入適量磷酸鹽緩沖液Ⅱ提取，分次將樣品轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶，用磷酸鹽緩沖液Ⅱ定容至刻度，充分混勻后轉(zhuǎn)入離心管，在4℃條件下10000r/min離心8min，取樣液10mL 待凈化。
*肝素親和柱使用前要恢復(fù)至室溫（25℃）
?活化：肝素親和柱使用前先將柱中保護(hù)液放掉，后加入5.0mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ活化；
?上樣：準(zhǔn)確將10.0mL樣液過柱，控制流速在1mL/min~3mL/min；
?淋洗：用10.0mL 磷酸鹽緩沖液Ⅱ淋洗，棄去流出液，用吸水紙擦拭干凈柱管內(nèi)壁殘留液體；
?洗脫：5.0mL磷酸鹽緩沖液Ⅰ洗脫，不要抽干；
?濃縮：收集洗脫液并用磷酸鹽緩沖液Ⅰ定容至5.00mL，過0.45μm PES水相針頭濾膜，上機(jī)待測。
色譜分析條件
?色譜柱：Jupiter C4 4.6×250mm 5μm 300?；P/No: 00G-4167-E0
?流動(dòng)相：A：0.1%三氟-乙酸水溶液；B：乙腈；
?流 速：1.0 mL/min；
?柱 溫：30 ℃；
?進(jìn)樣量：50 μL；
?梯度條件：
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
?標(biāo)準(zhǔn)曲線：
準(zhǔn)確移取牛乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，用磷酸鹽緩沖液Ⅰ稀釋定容，配制成濃度分別為 1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液，臨用現(xiàn)配。以物質(zhì)峰面積響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
實(shí)驗(yàn)譜圖
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
*注：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為扣除空白后結(jié)果
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