培氟沙星殘留ELISA檢測(cè)試劑盒(抗生素殘留)樣品制備
培氟沙星殘留ELISA檢測(cè)試劑盒(抗生素殘留)樣品制備:
1). 培氟沙星殘留ELISA檢測(cè)試劑盒(抗生素殘留)直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (通過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 通過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
為確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,樣品制備完成后需立即進(jìn)行檢測(cè)或妥善保存。對(duì)于需要短期儲(chǔ)存的樣品,建議置于4℃避光環(huán)境中,避免反復(fù)凍融;若需長(zhǎng)期保存,應(yīng)分裝后冷凍于-20℃,檢測(cè)前需混勻并恢復(fù)至室溫。
檢測(cè)過(guò)程中需特別注意以下操作細(xì)節(jié):加樣時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡,微量移液器槍頭需緊貼酶標(biāo)板孔底部緩慢釋放液體;孵育階段需使用板膜密封酶標(biāo)板,防止溶液蒸發(fā);洗滌步驟需保證每孔加液量一致,甩板時(shí)力度均勻,避免交叉污染。若樣品濃度超出檢測(cè)范圍,需用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重新測(cè)定。
對(duì)于特殊基質(zhì)樣品(如蜂蜜、組織勻漿等),建議進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)以驗(yàn)證前處理方法。同時(shí),每批檢測(cè)應(yīng)設(shè)置陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照及標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)品需按說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行梯度稀釋。當(dāng)檢測(cè)值接近臨界值時(shí),建議采用LC-MS/MS法進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)廢棄物應(yīng)按實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范處理,含抗生素的廢液需經(jīng)滅活后再排放。
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