Hoechst33258染色液
產(chǎn)品貨號:R23441
產(chǎn)品規(guī)格:10ml/50ml
產(chǎn)品簡介:
Hoechst 33258也稱bisBenzimide H 33258或HOE 33258,分子式為C25H24N6O ·3HCl,分子量為533.88,CAS Number 23491-45-4。Hoechst 33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低,常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也用于普通的細胞核染色、DNA染色。
Hoechst 33258的激發(fā)波長為346nm,發(fā)射波長為460nm,Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,激發(fā)波長為352nm,發(fā)射波長為461nm。尚寶生物 Hoechst 33258染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色,也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
Hoechst33258染色液 | 10ml | -20℃,避光 |
自備材料:
1. 熒光顯微鏡
2. 蒸餾水
3. 微量移液器
4. PBS或生理鹽水
操作步驟 (僅供參考) :
(一)固定的組織細胞染色
1. 對于細胞或組織樣品,固定后沖洗去除固定劑。如果需要進行免疫熒光染色,則行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進行 Hoechst 33258染色,如果不需要進行其它染色,則直接進行后續(xù)的Hoechst 33258染色。對于貼壁細胞或組織切片,加入少量Hoechst 33258染色液,覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞,至少加入待染色樣品3倍體積以上的Hoechst 33258染色液,充分混勻。
2. 室溫放置5~8min。
3. 輕輕吸除Hoechst 33258染色液。
4. 用無菌的 PBS 或生理鹽水清洗2~3次,每次3~5min。
5. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。
(二)活細胞染色
1. 取96、24、6孔板培養(yǎng)細胞至合適狀態(tài),按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例,加入適當?shù)?/span>Hoechst 33258染色液,染液必須充分覆蓋細胞。
2. 在適宜于細胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)20~30min。
3. 輕輕吸除Hoechst 33258染色液。
4. 用無菌的PBS或生理鹽水清洗2~3次,每次3~5min。
5. 進行熒光檢測。
注意事項:
1. Hoechst 33258染色液的濃度適用于大多數(shù)常規(guī)染色的需要。
2. 熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡快檢測?;罴毎蚪M織染色后宜立即觀察。
3. 為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4. 避免反復凍融,否則容易失效。
5. Hoechst 33258對人體有一定刺激性,請注意適當防護。
6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:6個月有效。
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