PDE3A測(cè)定試劑盒是一種熒光偏振（FP）均質(zhì)96孔板試劑盒，專(zhuān)為篩選和鑒定PDE3A（磷酸二酯酶3A）抑制劑而設(shè)計(jì)。該測(cè)定利用了一種特定的熒光磷酸鹽結(jié)合納米顆粒。試劑盒包含足夠的純化重組PDE3A（氨基酸669-1141（末端））、熒光探針、PDE測(cè)定緩沖液、結(jié)合劑以及稀釋液，可供100次反應(yīng)使用。

測(cè)定使用了標(biāo)記有熒光素的環(huán)化腺苷酸單磷酸（cAMP-FAM用于PDE3A），其中磷酸基團(tuán)嵌入在環(huán)狀核苷酸中。這是一種非常小的分子，旋轉(zhuǎn)速度快（低FP）。PDE3A催化環(huán)狀核苷酸中磷酸二酯鍵的水解，釋放出磷酸基團(tuán)。在第二步中，游離的磷酸基團(tuán)被一種特定的磷酸鹽結(jié)合納米珠（結(jié)合劑）識(shí)別，形成一個(gè)大復(fù)合物，其運(yùn)動(dòng)受限（高FP）。FP與PDE3A活性成正比。

艾美捷BPS Bioscience-PDE3A檢測(cè)試劑盒：

貨號(hào)：79736

同義詞：磷酸二酯酶3A，PDE3A，PDE3-A，PDE

試劑盒格式：熒光偏振

物種：人

提供方式：試劑盒包含足夠的純化重組PDE3A（氨基酸669-1141（末端））、熒光探針、PDE測(cè)定緩沖液、結(jié)合劑以及稀釋液，可供100次反應(yīng)使用。

所需材料但未提供：

-可調(diào)節(jié)微量移液器及無(wú)菌吸頭

-旋轉(zhuǎn)或搖動(dòng)平臺(tái)

-能夠測(cè)量熒光偏振的熒光微孔板讀取器（λex=470（5nm帶寬）和在λem=528（10nm帶寬）處檢測(cè)）

儲(chǔ)存/穩(wěn)定性：當(dāng)按照指示儲(chǔ)存時(shí)，該測(cè)定試劑盒在收到之日起6個(gè)月內(nèi)表現(xiàn)最佳。

使用說(shuō)明：請(qǐng)參閱試劑盒說(shuō)明書(shū)以獲取詳細(xì)操作步驟。

應(yīng)用：用于研究酶動(dòng)力學(xué)，并在高通量篩選（HTS）應(yīng)用中篩選小分子抑制劑以進(jìn)行藥物發(fā)現(xiàn)。

運(yùn)輸溫度：-80°C   

僅用于研究  

檢測(cè)結(jié)果示例：

圖：西洛他唑?qū)?span style="font-family: Calibri;">PDE3A的抑制作用。在200nMFAM-環(huán)化-3'，5'-AMP底物存在的情況下，PDE3A與西洛他唑的不同濃度進(jìn)行孵育。使用TecanM1000熒光微孔板讀取器測(cè)量熒光偏振。結(jié)果以活性百分比表示，其中在沒(méi)有抑制劑（陽(yáng)性對(duì)照）的情況下，FP被設(shè)定為100%。

文獻(xiàn)參考：

Kamel R., et al., 2023 Nat Rev Cardiol 20(2):90-108.

Nazir M., et al., 2017 Exp Cell Research 361(2):308-315.