賽默飛(Thermo Scientific)Qubit 4.0 熒光計是一種高靈敏度的核酸/蛋白質(zhì)定量儀器,其檢測依賴于熒光染料與目標(biāo)分子的特異性結(jié)合。使用原裝檢測管(Qubit Assay Tubes)是確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素,主要原因如下:
一、光學(xué)性能的精準(zhǔn)校準(zhǔn)
1、透光性優(yōu)化:原裝管采用特殊光學(xué)級透明塑料(如聚苯乙烯),確保熒光信號在特定波長(如~480 nm激發(fā)/~520 nm發(fā)射)下無背景干擾,避免因管壁散射或吸收導(dǎo)致信號偏差。
2、一致性:每批次原裝管的厚度、材質(zhì)均一,減少管間差異,保證重復(fù)實驗的可比性。
二、尺寸與儀器的匹配
1、幾何設(shè)計:Qubit 4.0的檢測孔針對原裝管(0.5 mL或1.5 mL規(guī)格)的直徑、高度和底部弧度優(yōu)化,確保樣品處于最佳光路位置。非原裝管可能因尺寸偏差導(dǎo)致熒光信號檢測不準(zhǔn)確(如信號強度波動±10%以上)。
2、適配性:原裝管可直接插入儀器,無需額外調(diào)整,避免因管體傾斜或偏移引起的誤差。
三、避免污染物干擾
1、無熒光背景:原裝管經(jīng)過特殊處理,不含熒光添加劑(如某些廉價離心管可能含有增塑劑或染料),防止假陽性信號。
2、低吸附表面:管壁經(jīng)親水涂層處理,減少核酸/蛋白質(zhì)的非特異性吸附(尤其對低濃度樣本至關(guān)重要)。
四、實驗標(biāo)準(zhǔn)化與質(zhì)控
1、認(rèn)證要求:賽默飛的操作手冊明確要求使用原裝管,否則可能影響數(shù)據(jù)有效性(尤其在發(fā)表論文或臨床檢測中)。
2、質(zhì)量控制:原裝管通過嚴(yán)格的無菌、無DNase/RNase認(rèn)證,避免樣本降解風(fēng)險。
五、成本與風(fēng)險的權(quán)衡
1、看似昂貴,實則節(jié)省:非原裝管可能導(dǎo)致數(shù)據(jù)異常,需重復(fù)實驗,反而增加時間和樣本成本。
2、風(fēng)險案例:用戶反饋顯示,使用普通離心管可能導(dǎo)致:
低濃度樣本(如<10 ng/μL DNA)定量結(jié)果偏高或偏低。
梯度稀釋樣本的線性關(guān)系(R2值)變差。
原裝檢測管是Qubit 4.0精準(zhǔn)定量的核心耗材,尤其在低濃度樣本、高靈敏度實驗中不可替代。雖然成本較高,但能最大限度減少實驗變量,確保數(shù)據(jù)可靠性。對于常規(guī)篩查或預(yù)算有限的情況,若選擇第三方管,務(wù)必進(jìn)行嚴(yán)格的性能驗證。
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