iFluor 790 succinimidyl ester可用于小動物體內(nèi)成像應(yīng)用
化學性質(zhì):
水溶性:具有高水溶性,可減少有機溶劑的使用。
光穩(wěn)定性:熒光信號穩(wěn)定,適合長時間成像。
熒光強度:熒光亮度強,優(yōu)于其他光譜相似的偶聯(lián)物。
pH不敏感:在廣泛的pH范圍內(nèi)具有很高的熒光強度。
基本參數(shù):
中文名:iFluor 790琥珀酰亞胺酯
英文名:iFluor 790 succinimidyl ester
分子量:1768.30
Ex(nm):787
Em(nm):812
規(guī)格標準:1g、5g、10g
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
使用方法:
1.準備蛋白質(zhì)儲備溶液(溶液A):
將100μL反應(yīng)緩沖液(如1 M碳酸氫鈉溶液或1 M磷酸鹽緩沖液,pH約9.0)與900μL目標蛋白溶液(如抗體,濃度>2 mg/mL)混合,制備1 mL蛋白質(zhì)標記溶液。
注意:蛋白質(zhì)溶液的pH值應(yīng)為8.5±0.5。如果蛋白質(zhì)溶液的pH低于8.0,使用1 M碳酸氫鈉溶液或1 M pH 9.0磷酸鹽緩沖液將pH調(diào)節(jié)至8.0-9.0的范圍。
注意:蛋白質(zhì)應(yīng)溶解于pH 7.2-7.4的1X磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中。如果蛋白質(zhì)溶解在Tris或甘氨酸緩沖液中,則必須用1X PBS透析,以去除游離胺或銨鹽。
2.準備染料儲備溶液(溶液B):
將無水DMSO加入到iFluor 790 SE小瓶中,制備10 mM的染料溶液,充分混合。
注意:染料溶液應(yīng)在制備后立即使用,避免長時間儲存。
3.進行偶聯(lián)反應(yīng):
使用10:1的摩爾比(溶液B染料/溶液A蛋白質(zhì))作為起始點:將5μL染料溶液(溶液B)加入到95μL蛋白質(zhì)溶液(溶液A)中,充分搖勻。
注意:建議使用10:1的染料/蛋白質(zhì)摩爾比。如果太少或太多,可以嘗試5:1、15:1和20:1來確定合適的染料/蛋白質(zhì)比。
在室溫下繼續(xù)旋轉(zhuǎn)或搖動反應(yīng)混合物30-60分鐘。
4.純化偶聯(lián)物:
使用Sephadex G-25柱純化染料蛋白偶聯(lián)物
相關(guān)應(yīng)用:
生物成像:適用于小動物活體成像、熒光西方印跡和顯微鏡成像。
多色分析:與遠紅色熒光團(如Cy5、Cy7或別藻藍蛋白)分離良好,便于多色分析。
體內(nèi)成像:可用于小動物體內(nèi)成像應(yīng)用。
包裝:
質(zhì)量控制:95%+
存儲條件:-20°C,避光,避濕
用途:僅供科研實驗使用,不用于診治
注意事項:取用一定要干燥,避免頻繁的溶解和凍干
取用:現(xiàn)配現(xiàn)用,將包裝從冰箱中取出,置于干燥器中緩慢升至室溫,打開瓶蓋,取用。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,及時放入冰箱。
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