UMNSAH/DF-1(雞胚成纖維細胞)在生物反應(yīng)器中的大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)優(yōu)化
UMNSAH/DF-1細胞是源自10日齡家雞胚胎的自發(fā)永生化雞胚成纖維細胞株,經(jīng)原代分離及長期傳代培養(yǎng)篩選獲得。該細胞株兼具成纖維細胞的典型特征與永生化細胞的穩(wěn)定增殖能力,在生物醫(yī)學(xué)研究中展現(xiàn)出獨-特優(yōu)勢,尤其適用于病毒學(xué)研究、重組蛋白表達及疫苗生產(chǎn)等領(lǐng)域。
UMNSAH/DF-1雞胚成纖維細胞特性
基礎(chǔ)屬性
種屬:家雞(Gallus gallus domesticus)
細胞形態(tài):成纖維細胞樣,呈梭形或星形貼壁生長
生長特性:接觸抑制明顯,但永生化特性保障長期傳代穩(wěn)定性
生物安全等級:BSL-1
關(guān)鍵優(yōu)勢
非轉(zhuǎn)化性安全:軟瓊脂集落形成試驗證實無致瘤性(免疫缺陷小鼠模型及半固體培養(yǎng)基中均未觀察到腫瘤形成)
溫度敏感性可控:專為禽類體溫設(shè)計(38-40℃),39℃為最佳培養(yǎng)溫度,避免37℃培養(yǎng)導(dǎo)致的狀態(tài)衰退
高穩(wěn)定性:經(jīng)超過30代傳代驗證,基因型與表型保持高度一致
培養(yǎng)指南
培養(yǎng)體系
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:DMEM(PM150210)
血清補充:10% FBS(164210)
抗生素:1%雙抗(PB180120)
氣體環(huán)境:5% CO? + 95%空氣
推薦傳代比例:1:3至1:8(每2-3天)
關(guān)鍵操作要點
溫度控制:
必須使用專用培養(yǎng)箱(38-40℃),溫度波動易誘發(fā)細胞空泡化
收貨后可能出現(xiàn)短暫空泡,穩(wěn)定培養(yǎng)2-3代可恢復(fù)
凍存與復(fù)蘇:
凍存液配方:55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 40%FBS + 5%DMSO
液氮長期保存,復(fù)蘇時快速融化并離心去除DMSO
換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基,維持營養(yǎng)供應(yīng)
應(yīng)用領(lǐng)域
病毒學(xué)研究:
作為禽類病毒(如禽-流感病毒、馬立克氏病病毒)增殖的優(yōu)選基質(zhì)
支持病毒滴度測定與疫苗株篩選
重組蛋白生產(chǎn):
高表達效率適用于禽源蛋白(如卵清蛋白、干擾素)的規(guī)?;苽?/p>
基因功能研究:
適用于CRISPR/Cas9基因編輯及穩(wěn)定細胞系構(gòu)建
疫苗開發(fā):
作為重組病毒載體疫苗的生產(chǎn)平臺(如腺病毒載體)
質(zhì)量控制
細胞身份驗證:STR基因分型與種屬特異性PCR確認
微生物檢測:無菌、支原體、病毒病原體陰性
活力保證:復(fù)蘇后存活率≥90%,傳代穩(wěn)定性驗證≥10代
來源追溯:ATCC保藏編號CRL-12203,全程可溯源
注意事項
避免37℃培養(yǎng),建議配置專用培養(yǎng)箱
傳代時消化時間控制在2-3分鐘,避免過度刮取損傷細胞
凍存管標(biāo)注清晰,嚴格遵循液氮保存規(guī)范
細胞信息
產(chǎn)品編號:UMNSAH/DF-1
保藏機構(gòu):ATCC(CRL-12203)
推薦配套試劑:
專用培養(yǎng)基套裝(含DMEM+FBS+雙抗)
細胞凍存液(預(yù)混型)
UMNSAH/DF-1細胞以其獨-特的溫度適應(yīng)性和非致瘤特性,成為禽類細胞模型中的標(biāo)-桿工具。嚴格遵循本指南操作,可最大限度發(fā)揮其在科研與工業(yè)應(yīng)用中的價值。
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