淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性是一種針對(duì)細(xì)胞內(nèi)病原體（包括病毒、某些細(xì)菌和寄生蟲）的細(xì)胞免疫形式。監(jiān)測(cè)淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的靶細(xì)胞毒性的最常見體外方法是細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測(cè)，例如ADCC（抗體依賴性細(xì)胞毒性）和TDCC（T細(xì)胞依賴性細(xì)胞毒性）。在這些檢測(cè)中，免疫效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞被共同培養(yǎng)。為了分析這種異質(zhì)性細(xì)胞群體中免疫效應(yīng)細(xì)胞的細(xì)胞毒性活性，能夠區(qū)分效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞群體是至關(guān)重要的，因?yàn)樗鼈兙哂胁煌谋硇?。使用膜可滲透的熒光染料CSFE（羧基熒光素琥珀酰亞胺酯）在與效應(yīng)細(xì)胞共培養(yǎng)之前對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記，能夠清晰地區(qū)分活的效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞。與靶細(xì)胞孵育后，可以添加DNA嵌入染料7-AAD來標(biāo)記正在死亡的靶細(xì)胞。這兩種染料具有不同的光譜特性，通過流式細(xì)胞術(shù)可以區(qū)分四種細(xì)胞群體：活靶細(xì)胞（CSFE?7-AAD?）、死靶細(xì)胞（CSFE?7-AAD?）、活效應(yīng)細(xì)胞（CSFE?7-AAD?）和死效應(yīng)細(xì)胞（CSFE?7-AAD?）。細(xì)胞毒性檢測(cè)對(duì)于理解CAR（嵌合抗原受體）T細(xì)胞和NK細(xì)胞以及基于抗體的免疫療法的效力至關(guān)重要。

細(xì)胞毒性染料試劑盒（CFSE，7-AAD）是用于確定效應(yīng)細(xì)胞對(duì)感興趣靶細(xì)胞的細(xì)胞毒性特征的試劑盒。它包含用于在靶細(xì)胞和PBMC混合細(xì)胞群體中標(biāo)記靶細(xì)胞的CFSE（羧基熒光素琥珀酰亞胺酯），以及用于標(biāo)記死細(xì)胞的7-AAD（7-氨基放線菌素D）。CFSE和7-AAD標(biāo)記使得通過流式細(xì)胞術(shù)在單細(xì)胞水平上檢測(cè)細(xì)胞毒性成為可能。試劑盒還包含檢測(cè)稀釋液。

艾美捷BPS Bioscience-細(xì)胞毒性染料試劑盒（CFSE，7-ADD）:

貨號(hào)：82296

應(yīng)用：在細(xì)胞毒性檢測(cè)中，通過流式細(xì)胞術(shù)分析活靶細(xì)胞、死靶細(xì)胞、活效應(yīng)細(xì)胞和死效應(yīng)細(xì)胞。

運(yùn)輸溫度：-80℃

警告：避免凍融循環(huán)

科學(xué)分類：CAR-T細(xì)胞療法

監(jiān)管狀態(tài)：僅供研究使用

儲(chǔ)存/穩(wěn)定性：按照指示儲(chǔ)存時(shí)，該檢測(cè)試劑盒在收到之日起6個(gè)月內(nèi)表現(xiàn)最佳。

所需材料但未提供

感興趣的效應(yīng)細(xì)胞。

感興趣的靶細(xì)胞。

用于細(xì)胞培養(yǎng)的U型底96孔板。

T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

結(jié)果示例：

圖：流式細(xì)胞術(shù)分析與效應(yīng)PBMCs共孵育的CFSE標(biāo)記NALM-6靶細(xì)胞。

將CFSE標(biāo)記的NALM-6細(xì)胞與PBMCs以10:1（E:T）的細(xì)胞比例共孵育24小時(shí)，左側(cè)未添加，右側(cè)添加了抗CD19-抗CD3雙特異性分子（BPS Bioscience #100441），并用7-AAD染色15分鐘。密度圖中的CFSE?/7-AAD?群體對(duì)應(yīng)于正在死亡的靶細(xì)胞（Q2-2）。