比色皿(Cuvette)是實(shí)驗(yàn)室中用于光學(xué)分析的關(guān)鍵器件,主要用于測(cè)量液體樣品的吸光度、透光率或熒光強(qiáng)度等光學(xué)參數(shù)。以下是其詳細(xì)用途和注意事項(xiàng):
一、比色皿主要用途
1、紫外-可見(jiàn)分光光度法(UV-Vis):測(cè)量溶液在特定波長(zhǎng)下的吸光度,用于定量分析(如濃度測(cè)定)或定性分析(如物質(zhì)鑒定)。
2、應(yīng)用場(chǎng)景:DNA/RNA濃度檢測(cè)(260nm)、蛋白質(zhì)檢測(cè)(280nm或Bradford法)、酶動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)等。
3、熒光光譜分析:特殊石英比色皿用于激發(fā)和檢測(cè)熒光信號(hào),適用于高靈敏度檢測(cè)(如熒光標(biāo)記物、量子點(diǎn)等)。
4、其他光學(xué)檢測(cè):可用于濁度測(cè)量、化學(xué)發(fā)光分析或動(dòng)態(tài)光散射(DLS)等。
二、比色皿的類型與選擇
1、石英
材質(zhì):熔融石英
適用波長(zhǎng)范圍:190~2500nm
典型應(yīng)用:紫外區(qū)檢測(cè)(如DNA、蛋白質(zhì))
2、光學(xué)玻璃
材質(zhì):硼硅酸鹽玻璃
適用波長(zhǎng)范圍:340~2500nm
典型應(yīng)用:可見(jiàn)光區(qū)檢測(cè)(如比色法)
3、塑料
材質(zhì):聚苯乙烯/丙烯酸
適用波長(zhǎng)范圍:340~800nm
典型應(yīng)用:教學(xué)實(shí)驗(yàn)或一次性使用(成本低)
4、熒光專用
材質(zhì):石英(四面透光)
適用波長(zhǎng)范圍:根據(jù)熒光波長(zhǎng)選擇
典型應(yīng)用:熒光光譜分析
三、使用注意事項(xiàng)
1、清潔與保存
使用后立即用蒸餾水或適當(dāng)溶劑(如乙醇)沖洗,避免樣品干涸。
指紋或劃痕會(huì)影響透光率,需用鏡頭紙或軟布擦拭。
長(zhǎng)期存放時(shí)避免疊放,防止磨損。
2、操作規(guī)范
手持比色皿的磨砂面,避免接觸透光面。
裝入液體體積不超過(guò)2/3,避免溢出污染儀器。
檢測(cè)前用待測(cè)溶液潤(rùn)洗2~3次,減少誤差。
3、兼容性檢查
確保比色皿與儀器光路匹配(如1cm標(biāo)準(zhǔn)光程最常見(jiàn))。
熒光實(shí)驗(yàn)需選擇低自發(fā)熒光的比色皿。
四、常見(jiàn)問(wèn)題
1、誤差來(lái)源:
劃痕、污漬或氣泡(需輕彈比色皿排除氣泡)。
不同比色皿間的透光差異(建議同一實(shí)驗(yàn)使用同一組比色皿)。
2、損壞跡象:
透光面霧化、裂紋或刻度模糊需立即更換。
比色皿的正確選擇和使用直接影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求嚴(yán)格匹配材質(zhì)和規(guī)格。
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