簡介

中壓制備色譜分離純化的上樣方式分為兩種：液體上樣和固體上樣。

它們有各自的優(yōu)缺點及適用范圍：

多年來，隨著自動化水平程度的提高，液體樣品進樣現(xiàn)在使用專用進樣閥完成，這提高了準(zhǔn)確性和安全性，減少了所涉及的手動步驟，并降低了污染的可能性。但對于溶解性不好的樣品依然存在它的局限性。而解決方式則又回到了固體上樣。

固體上樣前需要對樣品進行處理，俗稱“拌樣”，傳統(tǒng)的拌樣及上樣步驟為：

1. 稱取適量的純硅膠填料于研缽中

2. 將樣品溶解于有機試劑當(dāng)中

3. 用膠頭滴管將溶解后的樣品少量多次的滴于硅膠當(dāng)中并充分攪拌使其吸附且溶劑蒸發(fā)

4. 保證樣品充分且均勻的吸附于硅膠當(dāng)中（硅膠流體狀態(tài)與純硅膠相似即可）

5. 將吸附樣品的硅膠裝入固體上樣器（或上樣空柱管）當(dāng)中

6. 固體上樣器串聯(lián)在分離柱之前準(zhǔn)備進行分離純化過程

不難看出，固體上樣確實有夠麻煩，所以我們有沒有一種自動化的方式來減輕實驗人員的操作負擔(dān)呢？答案是肯定的。

實驗

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀配置：

主機：R-300+V-300+I-300Pro+F-305

配件：AutoDest 和 AutoDry

樣品：

將以下化合物溶解在 250mL 甲醇和 250mL 丙酮的混合物中，并在 50°C 下超聲 20 分鐘：^[1]

然后將溶液轉(zhuǎn)移到 1L 蒸發(fā)瓶中，加入 120g 硅膠 gel 60。燒瓶連接到 Rotavapor®R-300，配備 AutoDest 傳感器和AutoDry單元，帶砂芯的蒸汽管道(貨號:11057297)，V-300 真空泵和 F-305 再循環(huán)制冷機。參數(shù)如下：

由于 AutoDest（自動蒸餾）的存在，您無需進行任何壓力設(shè)置，傳感器會根據(jù)進出冷卻液的溫差及蒸汽濃度自適應(yīng)調(diào)節(jié)壓力值，該過程無需定期監(jiān)控，這將為您騰出時間去做其他實驗。整個實驗過程中，AutoDest 將蒸發(fā)溶劑降至最低，而 AutoDry 可將殘留溶劑快速蒸發(fā)至干，而不會受到用戶的任何干擾。這兩種配件與傳統(tǒng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的結(jié)合，為固體上樣的前期準(zhǔn)備實現(xiàn)了自動化。

結(jié)果

圖2顯示了整個過程中的系統(tǒng)壓力。在自動蒸餾過程中，壓力自動控制。它以一個穩(wěn)定的梯度開始，以防止爆沸。一旦在冷卻盤管處檢測到冷凝蒸汽，壓力就會保持穩(wěn)定。31 分鐘后(圖2 為 1860 秒)，壓力進一步降低以保持適當(dāng)?shù)睦淠?，最終在 54 分鐘后自動結(jié)束(圖2 為 3240 秒)。

54 分鐘自動蒸餾完成后，自動干燥過程開始。該系統(tǒng)通風(fēng)至常壓，以促進內(nèi)部玻璃壁上的溶劑冷凝和剩余溶劑向下流向接收瓶。然后系統(tǒng)自動啟動泵的最大聲功率進行干燥過程(具有預(yù)定義的干燥時間)。兩個短的排氣步驟(在壓力曲線中可見的尖峰)再次促進冷凝溶劑的下降。干燥 10min 后，系統(tǒng)壓力可低于 20mbar，測得溶劑總損失為7%。圖3為旋蒸制備后樣品的色譜圖。

結(jié)論

參考文獻