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一、連續(xù)脂質(zhì)體擠出儀使用前準(zhǔn)備
設(shè)備清潔
使用前需對擠出儀進(jìn)行徹底清潔，避免雜質(zhì)污染樣品。
清潔方法：
酒精清洗：用無水乙醇擦拭設(shè)備表面及內(nèi)部接觸樣品的部件(如注射器、濾膜支架等)。
高溫清洗：若設(shè)備支持高溫滅菌(如部分型號的擠出腔體)，可設(shè)定高溫程序(如121℃、20分鐘)進(jìn)行滅菌處理。
干燥處理：清洗后用氮氣吹干或自然晾干，確保無殘留液體。
濾膜安裝
濾膜選擇：根據(jù)目標(biāo)粒徑選擇合適孔徑的聚碳酸酯膜(PC膜)，常見孔徑為50nm、100nm、200nm等。
安裝步驟：
將膜支撐系統(tǒng)的兩個塑料單元分開，將O形環(huán)側(cè)向外插入鋼制外殼，頂部留幾毫米間隙。
在O形圈上鋪一層或兩層PC膜，確保膜平整無褶皺。
將另一個塑料單元放入外殼，使膜夾在兩個O形環(huán)之間，通過檢查孔觀察膜是否居中。
手動安裝端蓋，輕輕壓緊膜，避免過緊導(dǎo)致支撐系統(tǒng)或膜損壞。
樣品準(zhǔn)備
脂質(zhì)體制備：
薄膜分散法：將磷脂溶解在有機(jī)溶劑(如氯仿)中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑形成脂質(zhì)膜，再用水相水合膜并振蕩(手動或機(jī)械振蕩器)生成多層脂質(zhì)體。
其他方法：也可采用溶劑注入法、逆向蒸發(fā)法或微流控技術(shù)制備粗脂質(zhì)體。
預(yù)處理：若樣品中含大顆粒或聚團(tuán)，需先用超聲或高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)處理，避免堵塞濾膜。
二、操作步驟
樣品裝載
將制備好的脂質(zhì)體溶液倒入玻璃注射器中，確保無氣泡。
將注射器連接到擠出儀的進(jìn)料口(膜支架上)，輕輕按壓注射器至停止，順時針旋轉(zhuǎn)四分之一圈密封。
擠出過程
動力源選擇：
手動擠出：均勻推動注射器活塞，力度沿注射器方向，避免偏斜導(dǎo)致漏液。
氣動擠出：以氮氣或壓縮空氣為動力源，通過氣缸增壓推動活塞擠出樣品。
擠出方向：
完成一次單方向擠出后，交換兩只注射器位置，繼續(xù)擠出直至達(dá)到目標(biāo)粒徑或更換孔徑更小的濾膜。
擠出次數(shù)：一般配方需擠出3-10次，探索最佳工藝條件。
參數(shù)控制
壓力與流量：通過調(diào)節(jié)動力源(如氮氣壓力)控制擠出壓力，確保脂質(zhì)體膜均勻形成。
溫度控制：若樣品對溫度敏感，可將注射器放入水浴中，根據(jù)實驗需求設(shè)定溫度(如25℃、37℃)。
粒徑監(jiān)測：擠出過程中可取樣用粒度儀監(jiān)測粒徑變化，及時調(diào)整擠出次數(shù)或濾膜孔徑。
三、使用后處理
設(shè)備清潔與保養(yǎng)
濾膜拆卸：擠出完成后，拆卸濾膜，用清水沖洗干凈，干燥后備用(PC膜為一次性使用，不可重復(fù)利用)。
部件清洗：用溫和清潔劑溶液清洗注射器、膜支架等部件，再用去離子水沖洗并晾干。
O形圈檢查：每次使用前檢查O形圈是否有磨損，磨損需立即更換，避免操作時泄壓。
樣品處理
純化：擠出后的脂質(zhì)體需經(jīng)過超濾等步驟去除未封裝藥物或雜質(zhì)，確保產(chǎn)品純度。
儲存：將純化后的脂質(zhì)體溶液分裝至無菌容器中，4℃保存?zhèn)溆谩?br />
四、連續(xù)脂質(zhì)體擠出儀注意事項
操作規(guī)范
推動注射器時力度均勻，避免用力過猛導(dǎo)致濾膜破裂或設(shè)備損壞。
操作過程中保持注射器方向筆直，防止漏液。
舉起或移動設(shè)備時注意周圍人員安全，避免碰撞。
故障排查
擠出緩慢或無法擠出：
原料藥粒徑過大，濾膜孔徑過?。合扔么罂讖綖V膜均質(zhì)，再切換小孔徑濾膜。
物料溫度敏感導(dǎo)致凝聚：調(diào)整工作溫度(如加熱或冷卻)。
濾膜通道堵塞：更換新濾膜。
擠出時阻力異常：
濾膜破損：若推動注射器時阻力突然減小，需拆開設(shè)備更換濾膜。
O形圈磨損：檢查并更換磨損的O形圈。
安全防護(hù)
操作時穿戴防護(hù)手套和護(hù)目鏡，避免樣品接觸皮膚或眼睛。
若使用有機(jī)溶劑，需在通風(fēng)櫥中操作，防止吸入有害氣體。
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