一、菌株簡介

銅綠假單胞菌（P.Aeruginosa）原稱綠膿桿菌。是假單胞菌屬的代表菌種。在自然界分布廣泛，為土壤中存在的見的細(xì)菌之一。各種水、空氣、正常人的皮膚、呼吸道和腸道等都有本菌存在。本菌是一種常見的條件致病菌，屬于非發(fā)酵革蘭氏陰性桿菌。

革蘭陰性桿菌，菌體細(xì)長，長短不一，有時(shí)呈球桿狀或線狀，成對或短鏈狀排列。菌體的一端有單鞭毛，在暗視野顯微鏡或相差顯微鏡下觀察可見細(xì)菌運(yùn)動(dòng)活潑。

本菌為專性需氧菌，生長溫度范圍25~42℃，生長溫度為25~30℃，特別是該菌在4℃不生長而在42℃可以生長的特點(diǎn)可用以鑒別。在血瓊脂平板上35℃培養(yǎng)18-24h，形成大而扁平、濕潤、有金屬光澤、藍(lán)綠色透明溶血環(huán)的菌落，有生姜味。

在麥康凱瓊脂平板上，可形成5種不同的菌落：

1）典型菌落：菌落形態(tài)不規(guī)則，邊緣呈傘狀伸展。

2）大腸菌樣型：菌落圓形凸起，無色透明，似大腸埃希菌。

3）粗糙型：菌落呈紐扣狀，表面粗糙，或菌落隆起邊緣扁平。

4）黏液型：菌落光滑，隆起，呈黏液裝，嵌入培養(yǎng)基中，不易挑起，似肺炎克雷伯菌菌落，但菌落成無色半透明。

5）侏儒型：生長緩慢，培養(yǎng)18h尚不見菌落，24h后才有細(xì)小菌落。

在普通培養(yǎng)基上可以生存并能產(chǎn)生水溶性的色素，如綠膿素（pyocynin）與帶熒光的水溶性熒光素（pyoverdin）等。在血平板上會(huì)有透明溶血環(huán)。

二、細(xì)菌特性

（1）形態(tài)染色革蘭陰性桿菌，菌體呈球桿狀或長絲狀，長短不一；單個(gè)、呈雙或短鏈狀排列；無芽胞，有莢膜，一端有單鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，臨床分離株常有菌毛。

（2）培養(yǎng)特性專性需氧菌，部分菌株能在兼性厭氧環(huán)境中生長，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長良好，可生長溫度范圍是25℃~42℃，生長溫度35℃，4℃不生長而42℃生長是該菌的鑒別點(diǎn)之一。在血平板、麥康凱平板上均可形成5種不同形態(tài)的菌落：

①典型型，菌落呈灰綠色，大小不一，扁平濕潤，邊緣不規(guī)則，呈傘狀伸展，表面常可見金屬光澤；

②大腸菌樣型，菌落圓形凸起，灰白色半透明，似大腸埃希菌菌落；

③黏液型，菌落光滑凸起，呈黏液狀；

④侏儒型，細(xì)小，無光澤半透明菌落；

⑤粗糙型，菌落凸起，邊緣扁平，表面粗糙。在血平板上?？梢娡该魅苎h(huán)，有生姜?dú)馕?；在液體培養(yǎng)基中呈混濁生長，表面可形成菌膜，在SS瓊脂平板上，該菌經(jīng)過24h培養(yǎng)形成較小無色半透明菌落，一般不易與沙門菌和志賀菌菌落相區(qū)別，但經(jīng)48h培養(yǎng)菌落呈棕綠色。銅綠假單胞菌在普通瓊脂平板上生長時(shí)，可產(chǎn)生多種色素，主要為綠膿素（為銅綠假單胞菌特征性色素）和青膿素（熒光素），前者為藍(lán)綠色。從臨床標(biāo)本分離的銅綠假單胞菌約有80%~90%產(chǎn)生綠膿素和青膿素。

（3）生化反應(yīng)氧化酶陽性，在OF培養(yǎng)基上，能氧化利用葡萄糖、木糖產(chǎn)酸，精氨酸雙水解酶陽性，乙酰胺酶陽性，液化明膠，利用枸櫞酸鹽，還原硝酸鹽并產(chǎn)生氮?dú)?，吲哚陰性?/span>

（4）抗原構(gòu)造銅綠假單胞菌有菌體（O）抗原、鞭毛（H）抗原、黏液（S）抗原和菌毛抗原。O抗原有兩種成分：一種是外膜蛋白，為保護(hù)性抗原，免疫性強(qiáng)，具有屬特異性；另一種為脂多糖（LPS），具有型特異性，可用于細(xì)菌分型。

（5）抵抗力銅綠假單胞菌對外界因素的抵抗力比其他無芽胞菌強(qiáng)，在潮濕的環(huán)境中能長期生存。對干燥、紫外線有抵抗力，但對熱抵抗力不強(qiáng)，臨床分離菌株對多種抗生素不敏感。

三、耐藥性

銅綠假單胞菌的耐藥機(jī)制異常復(fù)雜，總括之，主要與以下因素有關(guān)：

①細(xì)菌產(chǎn)生抗菌活性酶，如β-內(nèi)酰胺酶、氨基糖苷鈍化酶等。

②細(xì)菌改變抗菌藥物作用的靶位，如青霉素結(jié)合蛋白(PBPs)、DNA旋轉(zhuǎn)酶等結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而逃避抗菌藥物的抗菌作用。

③外膜通透性降低。

④生物膜形成。

⑤主動(dòng)泵出系統(tǒng)；等等。

其中主動(dòng)泵出系統(tǒng)在銅綠假單胞菌多重耐藥機(jī)制中起著主導(dǎo)作用。

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