.抽樣方法

從整批產(chǎn)品堆垛的上下不同部位隨機(jī)抽取2.2規(guī)定的件數(shù)，逐件開啟。分別倒出全部茶葉于塑料布上，用取樣鏟從每件中各取出有代表性的樣品約500g。將所取樣品充分混勻，用四分法或分樣器逐步縮分出500g，裝入潔凈密封的樣品筒內(nèi)，加封后，標(biāo)明標(biāo)記，及時送實(shí)驗室。

4.4.試樣制備

將所取回樣品全部磨碎，通過20目篩，混勻，均分成兩份試樣，裝入潔凈容器內(nèi)，密封，標(biāo)明標(biāo)記。

4.5.試樣保存

將試樣于室溫下保存。

注：在抽樣和制樣的操作過程中，必須防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化。

5.過程簡述

5.1.提取

稱取試樣5.0g（到0.1g）置于100mL具塞錐形燒瓶中，加入15mL三氯甲烷，于振蕩器上提取30min，然后經(jīng)墊有玻璃纖維的漏斗過濾。收集濾液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器的具尾管圓底燒瓶內(nèi)，并用三氯甲烷洗滌濾渣，收集濾液至約20mL。

5.2.凈化

用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將上述濾液在50℃水浴中濃縮至約1mL，經(jīng)0.45μm濾膜過濾后，注入硅膠小柱中。用2～4mL正己烷洗滌燒瓶后淋洗小柱，棄去流出液。然后用3～4mL三氯甲烷-甲醇溶液以每秒鐘2滴的流速洗脫，收集洗脫液于離心管中。用氮?dú)饩従彺蹈?，供衍生用?/p>

5.3.衍生

5.3.1.試樣

加200μL正己烷和50μL三fuyisuan于上述離心管中，蓋緊磨口塞，超聲振蕩1min，靜置10min，打開磨口塞，緩緩?fù)ㄈ氲獨(dú)庵粮?。用乙?水溶液（1＋1）定容至1.0mL，超聲1min，用0.5μm濾膜過濾，濾液供液相色譜用。

5.3.2.標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

取1.0mL標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用氮?dú)饩従彺蹈?，?.3.1步驟操作。

5.4.測定

5.4.1.色譜條件

色譜柱：NOVAPAKc18，300mm×3.9mm（內(nèi)徑）；

流動相：甲醇-水溶液（42＋58）；

流速：0.8mL/min；

熒光檢測器：激發(fā)波長375nm，發(fā)射波長425nm；

色譜柱溫度：室溫。

5.4.2.測定

根據(jù)樣液中B1的含量情況，選定峰高相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液中B1衍生物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測線性范圍內(nèi)。對標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液的衍生物溶液等體積參插進(jìn)樣測定。在上述色譜條件下，B1衍生物保留時間約為8min。

5.4.3.空白試驗

除不加試樣外，按上述測定步驟進(jìn)行。

6.結(jié)果計算

用色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)或按下式計算試樣中B1的含量：