Leica徠卡熒光顯微鏡是用人眼不可見的一定波長的紫外線作為光源照射被檢物體,使之受激發(fā)而產(chǎn)生人眼可見的熒光,然后再經(jīng)Leica徠卡熒光顯微鏡成象系統(tǒng)放大來進(jìn)行鏡檢。熒光顯微術(shù)是生物、醫(yī)學(xué)中的重要研究手段,如圣生物組織、生理病理、微生物、醫(yī)藥、食品、化學(xué)等諸方面的鑒定等。
一基本原理
(一)熒光:在中通光是由發(fā)光體質(zhì)點(diǎn)的熱運(yùn)動(dòng)所引起的輻射;而熒光是非溫度輻射,是一種冷光。熒光有多種,如光化熒光、放射熒光、生物熒光、化學(xué)熒光等等。而是利用“光化熒光”這一原理設(shè)計(jì)制造,達(dá)到熒光顯微術(shù)鏡檢的目的。
由于的光源是利用人眼不可見的短波光——紫外線,因而就大大提高了物鏡的分辨率,圖象與背景的反差亦甚為明顯。
(二)熒光現(xiàn)象:在中將熒光物體放到光譜中的各色區(qū)域,就可發(fā)現(xiàn)引起熒光zui有效的光線是光譜上波長較短的區(qū)域,即近紫外線區(qū)域,波長紙業(yè)320~400nm。這種現(xiàn)象的實(shí)質(zhì)是分子吸收了短波光的能量,可以發(fā)發(fā)的形式以波長較長的熒光射出,而為人眼可見,這就是“熒光現(xiàn)象”。熒光接近可見光的紅光端,大部分的熒光現(xiàn)象是符合這一規(guī)律的。熒光現(xiàn)象可分為兩種:
1.*次熒光現(xiàn)象:在中又稱“固有熒光”或“自發(fā)熒光”,當(dāng)經(jīng)紫外線的照射后,就能發(fā)出熒光的物質(zhì)而謂之。
2.第二次熒光現(xiàn)象:在中又稱“繼發(fā)熒光”,當(dāng)經(jīng)紫外線照射后不能或只部分發(fā)生微弱的熒光,這樣就需先熒光素處理,再經(jīng)紫外線照射才能發(fā)生熒光,這是因組織內(nèi)吸附或溶解有熒光素的緣故。
在中熒光色素的種類甚多,大部分為制片技術(shù)中所用的染色劑,對(duì)各種被檢物體表現(xiàn)出不同的親和性。因此,對(duì)熒光色素的選擇、應(yīng)用濃度及處理時(shí)間等儲(chǔ)方面都需摸索和積累經(jīng)驗(yàn)。
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