在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中科研新手總會(huì)遇到各種不同棘手的問(wèn)題，比如空白值過(guò)高怎么辦？樣本要如何采集？血清能否反復(fù)凍融？等等，今天上海恒遠(yuǎn)要為您講解的是在實(shí)驗(yàn)中樣品或標(biāo)準(zhǔn)品“溢值”是什么原因造成的。

造成樣品或標(biāo)準(zhǔn)品 “溢值” 主要有以下幾點(diǎn)原因：
1）樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋
要嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)來(lái)稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
2）偶合試劑不正確稀釋
要嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)來(lái)稀釋偶合試劑，濃度過(guò)高會(huì)造成OD的 “溢值” HRP偶合試劑的不正確稀釋
3）所用稀釋液不對(duì)
只能使用相應(yīng)試劑盒內(nèi)的稀釋液稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
4）檢測(cè)波長(zhǎng)不正確
要保證分光光度劑的檢測(cè)波長(zhǎng)是正確的。
5）TMB底物的顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)
請(qǐng)監(jiān)控顯色時(shí)間。說(shuō)明書(shū)中所示的顯色時(shí)間可能因?yàn)闇囟群推渌鼨z測(cè)條件的不同而稍有變化。
6）樣品不適合此檢測(cè)
在說(shuō)明書(shū)中會(huì)列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍，超出范圍的標(biāo)本可能不適于此試劑盒或者檢測(cè)條件需要摸索（如調(diào)節(jié)稀釋度等）
7）樣品/標(biāo)準(zhǔn)品污染
樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的污染可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果“溢值”。
8）孵育時(shí)間/溫度不正確
要嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)來(lái)確定孵育時(shí)間和溫度。
9）在孵育時(shí)為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物
在孵育時(shí)需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物，以防止液體蒸發(fā)或孵育期間的污染。每個(gè)試劑盒內(nèi)均有足夠數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物

如果您的實(shí)驗(yàn)也同樣遇到樣品或標(biāo)準(zhǔn)品“溢值”，那么就需要仔細(xì)檢查是否是您試劑的問(wèn)題或者是操作方法不當(dāng)?shù)膯?wèn)題。只有質(zhì)量良好的試劑和正確的操作才是的實(shí)驗(yàn)搭檔。

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