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人類(lèi)染色體核型分析實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)原理
核型（karyotype）一詞在20世紀(jì)20年代首先由蘇聯(lián)學(xué)者T. A. Levzky等人提出。核型分析的發(fā)展有三項(xiàng)技術(shù)起了很重要的促進(jìn)作用，一是1952年美籍華人細(xì)胞學(xué)家徐道覺(jué)發(fā)現(xiàn)的低滲處理技術(shù)，使中期細(xì)胞的染色體分散良好，便于觀察；二是秋水仙素的應(yīng)用便于富集中期細(xì)胞分裂相；三是植物凝集素（PHA）刺激血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化、分裂，使以血培養(yǎng)方法觀察動(dòng)物及人的染色體成為可能。
核型是指染色體組在有絲分裂中期的表型，包括染色體數(shù)目、大小、形態(tài)特征等。核型分析是對(duì)染色體進(jìn)行測(cè)量計(jì)算的基礎(chǔ)上，進(jìn)行分組、排隊(duì)、配對(duì)并進(jìn)行形態(tài)分析的過(guò)程。核型分析對(duì)于探討人類(lèi)遺傳病的機(jī)制、物種親緣關(guān)系與進(jìn)化、遠(yuǎn)緣雜種的鑒定等都有重要意義。將一個(gè)染色體組的全部染色體逐個(gè)按其特征描繪下來(lái)，再按長(zhǎng)短、形態(tài)等特征排列起來(lái)的圖像稱(chēng)為核型模式圖，它代表一個(gè)物種的核型模式。
1960年，丹佛會(huì)議上，提出了人類(lèi)有絲分裂染色體命名標(biāo)準(zhǔn)體制草案，為以后的所有命名方法奠定了基礎(chǔ)。1963年，倫敦會(huì)議上，正式批準(zhǔn)Patan 提出的A、B、C、D、E、F、G七個(gè)字母表示七組染色體的分類(lèi)法。1966年，芝加哥會(huì)議上，提出人類(lèi)染色體組和畸變速記符號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)命名體制。
A組（1-3號(hào)）
1號(hào)：zui大的中央著絲粒染色體，長(zhǎng)臂靠近著絲粒外有次縊痕。
2號(hào)：zui大的亞中著絲粒染色體。
3號(hào)：中央著絲粒染色體，比1號(hào)小三分之一。
B組（4-5號(hào)）：為較大的亞中央著絲粒染色體，二者不易區(qū)分。
C組（6-12號(hào)，X）：中等近中央著絲粒染色體，彼此難區(qū)分。
6、7、9、11號(hào)：著絲粒略近中央。
8、10、12號(hào)：偏離中央。
9號(hào)：q有次縊痕。
X位于6、7之間。
D組（13-15號(hào)）：中等近端著絲點(diǎn)染色體，p常有隨體。
E組（16-18號(hào)）
16號(hào)：中等中央著絲粒染色體，q上有次縊痕。
17號(hào)：較小，近中央著絲粒染色體。
18號(hào)：較小，近中央著絲粒染色體，p比17號(hào)更短。
F組（19-20號(hào)）：小的中央著絲粒染色體，彼此不易區(qū)分。
G組（21-22號(hào)，Y）：小的近端著絲粒染色體。
21、22號(hào)：p常有隨體，q常呈分枝狀彼此不易區(qū)分。
Y：p無(wú)隨體，q通常平行靠近。
人類(lèi)染色體核型分析實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)試劑
Geimsa染色液等。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備
攝影顯微鏡，顯微測(cè)微尺，染色缸，吹風(fēng)機(jī)等。
實(shí)驗(yàn)材料
人外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本
實(shí)驗(yàn)步驟
1、將人外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本放入染色缸，用Geimsa染色液染色10-15分鐘→在盛水塑料杯中沖涮→風(fēng)干→鏡檢
觀察細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)為：
（1）細(xì)胞完整，輪廓清晰，染色體分布在同一水平面上。
（2）染色體形態(tài)和分布良好。
（3）無(wú)重疊，即使有個(gè)別重疊，也要能明確辯認(rèn)，以免差錯(cuò)。
（4）所觀察的細(xì)胞處于同一有絲分裂階段，即染色體螺旋化程度或染色體長(zhǎng)短大致一樣。
（5）在所觀察的細(xì)胞周?chē)瑳](méi)有離散的單個(gè)或多個(gè)染色體存在，以免影響計(jì)數(shù)。
2、顯微攝影：將制好的片子放在數(shù)碼攝影顯微鏡下進(jìn)行拍攝，以供分析。
3、核型分析
核型：一個(gè)細(xì)胞內(nèi)所有染色體按一定順序排列起來(lái)，代表著某一個(gè)體所有細(xì)胞的染色體組成，包括數(shù)目、形態(tài)、大小等，分為A、B、C、D、E、F、G等七組和一組性染色體。
組型：把核型按模式圖的形式表現(xiàn)出來(lái)，代表一個(gè)種的染色體組成。
4、完成染色體組型分析。
注意事項(xiàng)
顯微照片分析：
染色體計(jì)數(shù)；染色體測(cè)量；
相對(duì)長(zhǎng)度=單個(gè)染色體長(zhǎng)度/ 整套單倍染色體總長(zhǎng)×100
臂比率=q/p
著絲點(diǎn)指數(shù)=p/(p q) ×100
人類(lèi)染色體核型分析實(shí)驗(yàn)
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