鹽析法抗體純化實(shí)驗(yàn)操作

來源：上海譽(yù)貿(mào)實(shí)業(yè)有限公司 2014年02月11日 10:21

鹽析法抗體純化實(shí)驗(yàn)操作
取1X ml血清加1X ml生理鹽水，于攪拌下逐滴加入2X ml飽和硫酸銨，硫酸銨的終飽和度為50%。
↓4℃，3h以上，使其充分沉淀

離心（3000rpm），20min，充上清，以x ml生理鹽水溶解沉淀，再逐滴加飽和硫酸銨x/2ml。
↓置4℃3h以上，[此時(shí)，（nh4）2so4的飽和度為33%]

重復(fù)上述第二步過程1～2次。末次離心后所得沉淀物為γ-球蛋白，以0.02% mol/l pH7.4pbs溶解至x ml裝入透析袋。

↓對(duì)PBS充分透析、換液3次，至萘氏試劑測(cè)透析外液無黃色，即無NH4+為止。
取透析袋內(nèi)樣品少許作適當(dāng)倍數(shù)稀釋后，以752型紫外分光光度計(jì)測(cè)定蛋白含量。

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