国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網>技術中心>行業(yè)標準>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

細胞周期檢測方法(PI法)

來源:上海乾思生物科技有限公司   2014年02月24日 19:06  

細胞周期檢測染料:
可用于細胞周期檢測的熒光染料有碘化丙啶(Propidium,簡稱PI)、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,簡稱DAPI)、Hochest、7氨基放線菌素(7-Amino-ActinomycinD,簡稱7AAD)等。


細胞周期PI法原理:

PI法是較常見的一種周期檢測方法。PI是一種雙鏈DNA的熒光染料,與雙鏈DNA結合后可產生熒光,并且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比。細胞內的DNA被PI染色后,可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定,然后根據DNA含量的分布情況,可進行細胞周期分析。PI染色后,假設G0/G1期細胞的熒光強度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2,正在進行DNA復制的S期細胞的熒光強度為1-2之間。

PI法檢測細胞周期

細胞周期檢測步驟:

1. 細胞樣品的準備:
    收集細胞,用1ml預冷PBS洗1遍,輕輕彈擊離心管底以適當分散細胞,避免細胞成團。
2. 細胞固定:
    加入1ml預冷的70%乙醇中,輕輕吹打混勻,4度固定2小時或更長時間(固定12-24小時可能效果更佳)。1000g離心3-5分鐘,沉淀細胞(如果細胞沉淀不充分,可以適當延長離心時間或加大離心力)。棄上清,用用1ml預冷PBS洗1遍。
3. PI染色:
    每個樣品用0.5ml染色緩沖液(或PBS)重懸,加入25ul PI染色液(20×)、10ul RNase A(50×)。37度避光溫浴30分鐘。
4. 流式檢測:
    用流式細胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光,同時檢測光散射情況。采用分析軟件進行細胞DNA含量分析和光散射分析。

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
定结县| 积石山| 合作市| 东宁县| 逊克县| 侯马市| 威信县| 获嘉县| 黄大仙区| 九龙县| 武冈市| 涟水县| 贵阳市| 明光市| 镇远县| 鄯善县| 苗栗县| 曲沃县| 青浦区| 宿松县| 溧阳市| 探索| 视频| 聂拉木县| 革吉县| 绥宁县| 开封县| 清苑县| 峨山| 潜江市| 靖宇县| 麟游县| 开封县| 黄骅市| 汨罗市| 尚志市| 醴陵市| 井陉县| 齐河县| 临武县| 江华|