干擾素蛋白表達問題解答
請教各位幾個問題:我用pGEX-6p-1做的干擾素蛋白表達
問題1:采用一系列不同尿素濃度的復性緩沖液進行復性,這一系列復性緩沖液可以重復利用嗎?如果還有其他蛋白可以同時使用進行復性嗎?
答案1.現(xiàn)用現(xiàn)配,因為使用后的系列緩沖液各種成分(尿素,氧化型還原型谷胱甘肽等)濃度改變,你根本不好確定下次復性時的準確條件,重復性不好把握;
問題2:復性后,不經(jīng)過過柱純化直接進行抗病毒活性檢測可以嗎?
答案2.不經(jīng)過柱純化,直接用融合蛋白進行抗病毒活性檢測么?那標簽GST怎么辦,應(yīng)該上柱后酶切再收集目的蛋白檢測吧;
問題3:檢測有活性后可以直接用來免疫動物嗎?(同樣是未經(jīng)過柱純化)
答案3.結(jié)論同上。
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