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2014版教您如何使用ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)

來源:上海研生實(shí)業(yè)有限公司   2014年05月14日 15:40  

很多人在實(shí)驗(yàn)過程中,難免會(huì)遇到各種不同的問題,比如ELISA試劑盒正態(tài)分布及標(biāo)準(zhǔn)差 ,真值 ,質(zhì)控血清如何使用,實(shí)驗(yàn)的效果不好等等?,F(xiàn)在就由上海研生實(shí)業(yè)有限公司為您解答一一解答您的在做實(shí)驗(yàn)過程中遇到的種種疑問!

正態(tài)分布及標(biāo)準(zhǔn)差 
ELISA試驗(yàn)中,檢驗(yàn)同一樣本達(dá)20次以上時(shí),就會(huì)發(fā)現(xiàn)這組數(shù)據(jù)(指測定結(jié)果的吸光 
值)分布在均值兩側(cè),大部分集中在均值附近。如果以測定值為橫坐標(biāo),以出現(xiàn)的頻率為 
縱坐標(biāo)作圖,就可繪出一個(gè)呈鐘形的曲線圖。如圖5-1,鐘頂處為均值,其他值以均值為 
中心對稱分布,這就是正態(tài)分布。 
換言之,當(dāng)ELSIA檢測同一樣本達(dá)一定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的 
±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的95%, 
在X±3SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的99%。當(dāng)我們要求檢驗(yàn)結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格 
時(shí),將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。 
ELISA試劑盒真值 
用確切的、的決定性方法測得的值,稱為真值。真值一般是測不到的。通過可 
靠的決定性方法測出的值,稱為靶值,通常用靶值來表示真值的大小。 
準(zhǔn)確度(accuracy) 
是指測定結(jié)果與真值(或靶值)接近的程度。準(zhǔn)確度不能以數(shù)字表示,往往用不準(zhǔn)確 
度來衡量。測定結(jié)果與靶值的偏離程度稱為偏差,它表示該項(xiàng)檢驗(yàn)的不準(zhǔn)確度。 
偏差=檢驗(yàn)的均值-真值(或靶值) 
相對偏差=偏差真值÷(或靶值)×100% 
精密度(Precision) 
是指對同一樣本重復(fù)測定時(shí),每次測定結(jié)果與平均值的接近程度,即重復(fù)測定值之間 
的符合程度。 
標(biāo)準(zhǔn)品 
1、標(biāo)準(zhǔn)品 由WHO或相應(yīng)組織標(biāo)定的,用肯定的、*的、準(zhǔn)確的物理或化學(xué)方法 
測定的定值材料。 
2、生物學(xué)活性標(biāo)準(zhǔn)品根據(jù)生物學(xué)反應(yīng)由WHO或相應(yīng)組織標(biāo)定的活性單位的材 
料。 
3、參考標(biāo)準(zhǔn)血清 化組織根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化的法定材料。可用于鑒定儀器和 
鑒定方法準(zhǔn)確性。 
 臨床決定性水平(clinical decision leuel) 
當(dāng)某個(gè)被測物的濃度達(dá)到某一水平時(shí),臨床醫(yī)師必須采用醫(yī)療措施。被測物的這濃度 
稱為臨床決定性水平。
ELISA試劑盒質(zhì)控血清的使用 
衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心制備的乙肝標(biāo)志物質(zhì)控血清,可以在-20℃保持半年定值不變。 
冰凍狀態(tài)融化使用時(shí),應(yīng)先混勻,未用完部分可在4℃保存5天。不宜反復(fù)冰融或自行分 
裝。開展某項(xiàng)檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清,一般按3-6個(gè)月用量準(zhǔn)備。自制的不 
定值質(zhì)控血清,在一批質(zhì)控血清將用完之前,需準(zhǔn)備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控血清要求性能 
穩(wěn)定,較長期內(nèi)效價(jià)不變,其理化性質(zhì)應(yīng)與病人樣本相近,這樣才能有效地起到監(jiān)測作 
用。 

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