【詞條中文名稱】牛血清白蛋白 【詞條拼音名稱】Níuxuèqīng báidànbái

　　【詞條英文名稱】Bovine albumin 　　【詞條英文別名】Bovine serum albumin 　　【詞條分類性質(zhì)】名詞詞組，偏正詞組 　　【詞條適用范圍】醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，藥學(xué)領(lǐng)域 　　【CAS數(shù)字登錄號(hào)】9048-46-8

　　1、用于生化研究、遺傳工程和醫(yī)藥研究 　　2、用作醫(yī)藥保健食品、調(diào)味品

3、維持滲透壓、pH緩沖、載體作用

　　以牛血為原料分離出血清，用硫酸銨分級(jí)沉淀后，經(jīng)辛酸處理精制而得。

　　每10g加100ml水進(jìn)行溶解，或用 PBS溶解也可，視用途而決定。然后分裝成小支。若不使用防腐劑可貯存在零下20或30攝氏度的恒溫柜中，若使用防腐劑（如0.1%*）則可貯存在零上4攝氏度的環(huán)境下。一般可存放數(shù)月不變質(zhì)。防腐劑可能對(duì)牛血清白蛋白的效果造成影響，應(yīng)慎用。

　　牛血清中的簡(jiǎn)單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白BSA，又稱第五組分，是牛血清中的一種球蛋白，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.430 kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，例如在western blot中作為Blocking agent。它是牛血清中的簡(jiǎn)單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量 　　產(chǎn)品 　　16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。

　　BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中，因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入BSA后，它可能起到“保護(hù)”或“載體”作用，不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會(huì)受到什么影響。對(duì)多數(shù)底物DNA而言，BSA可以使酶切更*，并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃，酶切反應(yīng)超過(guò)1h時(shí)，BSA可以使酶更加穩(wěn)定，因?yàn)樵诓缓?span>BSA的反應(yīng)緩沖液中，許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時(shí)間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。

　　1.BSA是酶的穩(wěn)定劑，防止酶的分解和非特異性吸附； 　　2.BSA能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱，表面張力及化學(xué)因素引起的變性的至于作用機(jī)理我不是很清楚，可能是因?yàn)樗Y(jié)構(gòu)中有17個(gè)二硫鍵，和一個(gè)巰基，巰基的化學(xué)反應(yīng)很活潑，二硫鍵有抗氧化還原的作用，因此可與多種陽(yáng)離子，陰離子和小分子結(jié)合； 　　3.BSA能防止酶吸附到管壁而損失。

牛血清白蛋白（BSA），又稱第五組分，是牛血清中的一種球蛋白，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為 66.430 kDa，等電點(diǎn)為4.8。

   牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，例如在western blot中作為Blocking agent。它是牛血清中的簡(jiǎn)單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。 　　血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白就是我們常說(shuō)的BSA.

　　牛血清白蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量為10的4次方這個(gè)級(jí)別，它不是一定的，而是多聚物的，有的地方測(cè)試數(shù)據(jù)為70 000這一數(shù)據(jù)是在做PCR的時(shí)候使用的數(shù)據(jù)。 　　牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等電點(diǎn)4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。 　　牛血清蛋白溶液可以作為測(cè)量蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線用。 　　一般買回來(lái)的牛血清蛋白是細(xì)小片狀的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以鐵為基本原料。

　　BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中，因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入BSA后，它可能起到“保護(hù)”或“載體”作用，不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會(huì)受到什么影響。對(duì)多數(shù)底物DNA而言，BSA可以使酶切更*，并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃，酶切反應(yīng)超過(guò)1h時(shí)，BSA可以使酶更加穩(wěn)定，因?yàn)樵诓缓?span>BSA的反應(yīng)緩沖液中，許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時(shí)間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。

　　1、特純級(jí)牛血清蛋白 　　用途：用作酶標(biāo)、金標(biāo)等診斷試劑的封閉劑，生化試驗(yàn)等。 　　性狀：淡黃色干燥粉末 　　2、無(wú)脂肪酸牛血清蛋白 　　用途：用作酶標(biāo)、金標(biāo)等診斷試劑的封閉劑、保護(hù)劑，尤其適用于容易受脂肪酸影響的產(chǎn)品和試驗(yàn)。 　　性狀：淡黃色干燥粉末 　　3、無(wú)蛋白酶牛血清蛋白 　　用途：用于酶標(biāo)、金標(biāo)等診斷試劑的封閉劑、保護(hù)劑，尤其適合血液脂類的診斷試驗(yàn)、脂類診斷試劑及對(duì)純度要求高的產(chǎn)品。 　　性狀：淡黃色干燥粉末 　　4、細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)牛血清蛋白 　　用途：無(wú)血清培養(yǎng)基的蛋白添加劑，供細(xì)胞培養(yǎng)使用。 　　性狀：淡黃色干燥粉末白蛋白

　　^[1]一般用分光光度法測(cè)物質(zhì)的含量，先要制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出所測(cè)物質(zhì)的含量。因此，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線是生物檢測(cè)分析的一項(xiàng)基本技術(shù)。

　　1. 凱氏定氮法 　　2. 雙縮脲法 　　3. Folin-酚試劑法 　　4. 紫外吸收法 　　5. 考馬斯亮藍(lán)法

　　1. 考馬斯亮藍(lán)試劑： 　　考馬斯亮藍(lán)G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% H3PO4，雍蒸餾水稀釋至1000ml,濾紙過(guò)濾。zui終試劑中含0.01%（W/V）考馬斯亮藍(lán)G—250,4.7%（W/V）乙醇，8.5%（W/V）H3PO4。 　　2. 標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液： 　　純的牛血清血蛋白，預(yù)先經(jīng)微量凱氏定氮法測(cè)定蛋白氮含量，根據(jù)其純度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。

　　1. 722S型分光光度計(jì)使用及原理。 　　2. 移液管使用。

　　試管編號(hào) 0 1 2 3 4 5 6 　　100ug/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白（ml） 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 　　0.15mol/L NaCl （ml） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 　　考馬斯亮藍(lán)試劑 （ml） 5 5 5 5 5 5 5 　　搖勻，1h內(nèi)以1號(hào)管為空白對(duì)照,在595nm處比色 　　3、以A595nm為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)（六個(gè)點(diǎn)為10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug），在坐標(biāo)軸上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 　?。?span>1）、利用標(biāo)準(zhǔn)曲線查出回歸方程。 　　（2）、用公式計(jì)算回歸方程。 　?。?span>3）、或用origin作圖 ，測(cè)出回歸線性方程。即A595nm=a×X( )+6 　　一般相關(guān)系數(shù)應(yīng)過(guò)0.999以上，至少2個(gè)9以上。 　　(4）、繪圖時(shí)近兩使點(diǎn)在一條直線上，在直線上的點(diǎn)應(yīng)該在直線兩側(cè)。

　　樣品即所測(cè)蛋白質(zhì)含量樣品（含量應(yīng)處理在所測(cè)范圍內(nèi)），依照操作步驟1操作，測(cè)出樣品的A595nm，然后利用標(biāo)準(zhǔn)曲線或回歸方程求出樣品蛋白質(zhì)含量。 　　一般被測(cè)樣品的A595nm值在0.1—0.05之間，所以上述樣品如果A595nm值太大，可以稀釋后再測(cè)A595nm值，然后再計(jì)算。

　　1. 玻璃儀器要洗滌干凈。 　　2. 取量要準(zhǔn)確。 　　3. 玻璃儀器要干燥，避免溫度變化。 　　4. 對(duì)照：用被測(cè)物質(zhì)以外的物質(zhì)作空白對(duì)照。