單克隆抗體藥物綜述

   摘 要: 通過淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)或基因工程技術(shù)制備單克隆抗體藥物 ,已經(jīng)成為生物制藥領(lǐng)域的一個重要方面 ,由于單克隆抗體藥物專一性強(qiáng)、 療效顯著 ,因此成為近年來研究的熱點(diǎn)藥物之一。此文就單抗藥物的分類、應(yīng)用進(jìn)行了綜述 ,并對其應(yīng)用前景及存在的不足作了概述。

    關(guān)鍵詞:單克隆抗體 抗體藥物 靶向 聯(lián)用

自 1975 年Koeh ler 和M ilstein 首先報(bào)道利用小鼠雜交瘤細(xì)胞制備單克隆抗體以來, 經(jīng)過近 30 年的發(fā)展, 單抗技術(shù)在生命科學(xué)研究及醫(yī)學(xué)實(shí)踐方面作出了杰出的貢獻(xiàn), 已經(jīng)成為了現(xiàn)代生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的支柱之一。

然而, 盡管單抗推動了生物診斷技術(shù)的革命, 但是在將單抗應(yīng)用于人體疾病的治療方面, 卻在長時間內(nèi)遲遲沒有進(jìn)展。早期的臨床試驗(yàn)結(jié)果都不盡人意, 這是因?yàn)槭笤磫慰箲?yīng)用于人體有許多限制].

現(xiàn)今上市的單抗藥物, 治療的領(lǐng)域主要集中在腫瘤、 自身免疫疾病、 器官移植排斥及病毒感染等領(lǐng)域。由于單抗具有明確的作用位點(diǎn), 與靶位點(diǎn)親和力高, 而且通過改造的抗體其免疫原性大大減弱, 這些因素使得單抗在臨床治療中具有特異性強(qiáng)、 見效快、 副作用較低等優(yōu)點(diǎn), 因而單抗治療有著廣闊的前景。目前, FDA 批準(zhǔn)上市的 17 個單抗藥物中即有 8 個是用于治療淋巴細(xì)胞腫瘤、 乳腺癌及結(jié)直腸癌等, 而在開發(fā)階段的單抗也有一半以上是與治療各種癌癥相關(guān)。可以預(yù)見, 在未來幾年來將有更多的治療性單抗藥物上市, 其*將進(jìn)一步擴(kuò)大。

目前, 單抗類藥物的市場銷售逐年提升的年均增長幅度在20%以上, 表現(xiàn)強(qiáng)勁。 用于治療非霍奇金淋巴瘤的單抗藥物R ituxan 已成為世界*的抗腫瘤藥物, 2003 年銷售為 14 . 89億美元, 2002 年為 11 . 63 億美元, 在 2002 年zui前 50位商標(biāo)名處方藥中排名 43 位。用于治療關(guān)節(jié)炎的單抗藥物Rem icade, 2002 年銷售額為 12 . 97 億美元, 當(dāng)年藥物銷售* 37 位。2000 年世界單抗藥物的銷售額為 22 . 05 億美元, 據(jù)F ro st&Sullivan 預(yù)測, 到 2003 年銷售額將達(dá)到 47 億美元。

下面就單克隆抗體藥物的研究進(jìn)展作一綜述。

1　 單克隆抗體藥物的分類

單抗藥物一般分為:治療疾病(尤其是腫瘤)的單抗藥劑、 抗腫瘤單抗偶聯(lián)物、 治療其他疾病的單抗。單抗藥劑針對的靶點(diǎn)通常為細(xì)胞表面的疾病相關(guān)抗原或特定的受體。如:zui早被美國 FDA批準(zhǔn)用于治療腫瘤的單抗藥物利妥昔單抗;抗腫瘤單抗偶聯(lián)物 ,或稱免疫偶聯(lián)物( Immunoconjugate) , 由單抗與有治療作用的物質(zhì)(如:放射性核素、 毒素和藥物等)兩部分構(gòu)成 ,其中包括放射免疫偶聯(lián)物、 免疫毒素、 化學(xué)免疫偶聯(lián)物 ,此外還有酶結(jié)合單抗偶聯(lián)物、 光敏劑結(jié)合單抗偶聯(lián)物等。

2　 作為腫瘤治療藥劑的單克隆抗體藥物

2. 1　 利妥昔單抗

在自身免疫性疾病形成過程中 ,B 細(xì)胞起重要作用。CD20是前B細(xì)胞向成熟淋巴細(xì)胞分化過程中表達(dá)的表面抗原 ,參與調(diào)節(jié)B細(xì)胞的生長和分化。利妥昔單抗(美羅華)是一種針對 CD20抗原的人鼠嵌合型單克隆抗體 ,是*個被FDA批準(zhǔn)用于臨床治療的單抗。進(jìn)入人體后可與 CD20 特異性結(jié)合導(dǎo)致 B 細(xì)胞溶解 ,從而抑制 B 細(xì)胞增殖 ,誘導(dǎo)成熟 B細(xì)胞凋亡 ,但不影響原始B細(xì)胞。它能通過介導(dǎo)抗體依賴的細(xì)胞毒性(ADCC) 、 補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性(CDC)作用和抗體與CD20分子結(jié)合引起的直接效應(yīng) ,包括抑制細(xì)胞生長 ,改變細(xì)胞周期以及凋亡等方式殺死淋巴瘤細(xì)胞。

由于利妥昔單抗藥物可以提高腫瘤細(xì)胞對化療的敏感性 ,所以利妥昔單抗藥物的優(yōu)勢就在于與其他治療藥物及治療方式配合使用。臨床研究表明美羅華單藥或聯(lián)合化療治療腫瘤具有良好的療效和安全性 ,但還是存在一定的毒副作用。夏忠軍等進(jìn)行的臨床研究:34例確診惰性淋巴瘤的患者接受含利妥昔的方案化療 ,結(jié)果總有效率為 92. 3 % ,*緩解率為60. 0 %。主要不良反應(yīng)為骨髓抑制 ,其它不良反應(yīng)包括惡心嘔吐、 輕度脫發(fā)和肝功能受損等。張曉艷等對 4例 CD20陽性非霍奇金淋巴瘤(NHL) 病人進(jìn)行了5次利妥昔單抗聯(lián)合自體外周血干細(xì)胞移植(APBSCT)的治療研究 ,結(jié)果顯示所有病人均對利妥昔單抗耐受良好 ,植入后在 8～11 d內(nèi)達(dá)造血重建 ,表明利妥昔單抗聯(lián)合APBSCT治療 CD20陽性NHL 是一種耐受及效果良好的方法。

2. 2　 曲妥珠單抗

曲妥珠單抗為一種針對 HER22/ neu的重組人源化 IgG單克隆抗體 ,能特異性識別 Her22調(diào)控的細(xì)胞表面蛋白 HER22 ,使其通過內(nèi)吞噬作用離開胞膜進(jìn)入核體內(nèi) ,抑制其介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo) ,從而起到治療腫瘤的作用。美國 FDA 于 1999 年批準(zhǔn)其上市 ,2002年在我國上市。大量臨床資料證實(shí)曲妥珠單用于乳腺癌的有效率為21 % ,而且它與化療聯(lián)合應(yīng)用明顯提高了生存時間。據(jù)報(bào)道 ,歐洲曲妥珠單抗輔助治療試驗(yàn)研究了曲妥珠單抗對 HER22 陽性伴有或不伴有淋巴結(jié)陽性的乳腺癌患者的療效 ,其中 1 組給予 1 年的曲妥珠單抗治療 ,另1組作為對照。曲妥珠單抗治療 1 年組與對照組相比 ,復(fù)發(fā)風(fēng)險減少了46 % ,兩組的整體生存率無明顯區(qū)別 ,說明曲妥珠單抗用于治療輔助化療后的 HER22陽性乳腺癌患者 ,明顯延長了患者的無病生存期。我國也對曲妥珠進(jìn)行了臨床研究 ,沈坤煒等對 42 例 Ⅱ～ ⅢA期浸潤性乳腺癌患者紫杉醇聯(lián)合曲妥珠單抗治療 24 周 ,結(jié)果單用新輔助化療組*緩解率為 26. 3 % ,在新輔助化療聯(lián)用曲妥珠單抗組為65. 2 % ,可見 ,對于 HER22 過表達(dá)的乳腺癌化療聯(lián)用曲妥珠單抗能顯著提高*緩解率。

2. 3　 阿倫珠單抗

阿倫珠單抗是人源化、 非結(jié)合型單抗 ,作用靶點(diǎn)為正常與異常B淋巴細(xì)胞的 CD52 抗原 ,CD52 廣泛分布于正常的 B淋巴細(xì)胞、 T淋巴細(xì)胞、 單核細(xì)胞、 巨噬細(xì)胞和B 淋巴細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞表面 ,在慢性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞表面尤為豐富。它與帶 CD52 的靶細(xì)胞結(jié)合后 ,通過宿主效應(yīng)子的補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(CDC) 、 抗體依賴性細(xì)胞毒性(ADCC)和細(xì)胞凋亡等機(jī)制導(dǎo)致細(xì)胞死亡。阿倫珠單抗作為一種作用機(jī)制*的單克隆抗體 ,對源于B和 T細(xì)胞的各種惡性腫瘤具有很好的治療作用。

     英國科學(xué)家應(yīng)用阿倫珠單抗和利妥昔單抗治療復(fù)發(fā)性淋巴瘤患者 ,結(jié)果總反應(yīng)率為 52 % ,其中*緩解 8 % ,表明聯(lián)合使用阿倫珠單抗和利妥昔單抗是安全可行的。在其它 T細(xì)胞惡性腫瘤的治療中:對 22 例 Ⅲ～ Ⅳ期皮膚 T細(xì)胞淋巴瘤(蕈樣肉芽腫病和 Sezary綜合征)患者靜脈輸注阿倫珠 12周 ,結(jié)果顯示阿倫珠具有非常好的療效 ,總有效率達(dá) 55 %。其中 ,紅皮病患者總有效率達(dá) 69 % ,片狀斑或皮膚腫瘤患者達(dá)40 %。阿倫珠單抗聯(lián)合其他藥物、 化療等治療腫瘤具有顯著的效果。但臨床研究表明 ,其還存在一些常見并發(fā)癥 ,如低血壓、 寒顫、 發(fā)熱、 惡心、 嘔吐、 氣短、 支氣管痙攣、 皮疹、疲乏、 呼吸困難、 頭痛、 腹瀉、 感染等。

2. 4　 西妥昔單抗

西妥昔單抗為 IgG 1 單克隆抗體 ,是表皮生長因子受體拮抗劑 ,可與表達(dá)于正常細(xì)胞和多種腫瘤細(xì)胞表面的表皮生長因子受體( EGFR)特異性結(jié)合 ,并競爭性阻斷 EGF和其他配體 ,如α 2轉(zhuǎn)化生長因子(TGF 2 α)的結(jié)合。它通過增加細(xì)胞周期抑制因子 p27kip 使得細(xì)胞周期停留在 G 1 期;增加 Bax表達(dá)和減少 bcl22表達(dá) ,誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡;它還可減少基質(zhì)金屬蛋白酶和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的產(chǎn)生。相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明 ,西妥昔單抗可抑制過度表達(dá) EGFR的腫瘤細(xì)胞的增殖 ,但是對缺乏 EGFR表達(dá)的腫瘤細(xì)胞則沒有抗腫瘤效果 ,還發(fā)現(xiàn)西妥昔與化療聯(lián)用要優(yōu)于單獨(dú)化療。

在對西妥昔單抗聯(lián)合化療的研究中 ,BOAD 試驗(yàn)zui為。576例晚期結(jié)直腸癌(ACRC)患者中 82 %的 EGFR 過表達(dá)。治療采取兩個方案 ,第1組用西妥昔單抗聯(lián)合伊立替康治療;第2組單獨(dú)用西妥昔單抗單藥治療。西妥昔單抗聯(lián)合伊立替康與單用西妥昔單抗相比 ,聯(lián)用療效優(yōu)于單一使用 ,有效率分別為23 %和11 % ,疾病控制率為 56 %和 32 % ,疾病進(jìn)展中位時間為4. 1和1. 5個月 ,中位生存時間為8. 6和6. 9個月 ,而且西妥昔單抗并沒有增加化療的副作用。以上臨床實(shí)驗(yàn)顯示:西妥昔單抗能夠克服 ACRC患者對伊立替康的耐藥性 ,生存質(zhì)量明顯提高。西妥昔單抗的毒副作用包括:痤瘡樣皮疹、 虛弱、 腹痛、 惡心、 嘔吐、 白細(xì)胞減少和過敏反應(yīng)等。其中痤瘡樣皮疹是zui常見的不良反應(yīng) ,皮疹主要分布在臉部和軀干上部 ,這可能是由于西妥昔單抗干擾了 EGF的表皮生理作用所致。

2. 5　 貝伐單抗

貝伐單抗是抗VEGF的人源化單抗 ,主要通過中和VEGF來阻斷其與內(nèi)皮細(xì)胞上的受體結(jié)合 ,使得腫瘤細(xì)胞不能得到養(yǎng)分和氧 ,起到治療腫瘤的作用。Presta 等將鼠抗人VEGF單克隆抗體(muMAB VEGF) A. 4. 6. 1 的互補(bǔ)決定區(qū)與人 IgG 1的恒定區(qū)框架嵌合 ,并對相應(yīng)氨基酸殘基加以修飾 ,zui終形成了人鼠嵌合型 VEGF單抗 ,仍然有 7 %的氨基酸來源于鼠抗體。實(shí)驗(yàn)表明 ,貝伐單抗用于治療腫瘤安全有效。鄭航等[12 ]探究貝伐單抗聯(lián)合伊立替康治療轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌的療效 ,90例患者中給予貝伐單抗聯(lián)合伊立替康治療的一組有效率為43. 3 % ,血清腫瘤標(biāo)志物的濃度治療前后有顯著變化。這說明貝伐聯(lián)合伊立替康治療轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌具有更高的疾病控制率。2005 年美國臨床腫瘤學(xué)會年會上報(bào)道了貝伐單抗的研究結(jié)果 ,采用貝伐單抗聯(lián)合伊立替康和順鉑一線治療轉(zhuǎn)移性胃癌或者胃食管連接部腺癌的患者 ,治療的不良反應(yīng)除了原有伊立替康和順鉑引起的腎髓抑制、 胃腸道反應(yīng)等 ,還有貝伐單抗造成的不良反應(yīng)包括栓塞性疾病、胃穿孔等。

3　 抗腫瘤單抗偶聯(lián)物

3. 1　 放射免疫偶聯(lián)物

放射免疫治療(RIT)是以單克隆抗體為載體 ,以放射性核素為彈頭 ,通過抗體特異性結(jié)合腫瘤細(xì)胞相關(guān)抗原 ,將產(chǎn)生高能射線的放射性核素靶向到腫瘤細(xì)胞 ,實(shí)現(xiàn)對腫瘤的近距離內(nèi)照射治療。RIT利用攜帶放射性核素的單克隆抗體特異地結(jié)合到病灶部位 ,減少了對正常組織的損傷。90Y— ibri2tumomab是第1個被 FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床的放射免疫制劑 ,主要用于復(fù)發(fā)的淋巴瘤患者或?qū)为?dú)應(yīng)用利妥昔單抗療效不佳的患者。

3. 2　 免疫毒素

免疫毒素是用化學(xué)方法或基因工程方法將腫瘤選擇性單抗與經(jīng)修飾的多肽毒素共價連接而成的腫瘤治療藥物。免疫毒素可與腫瘤細(xì)胞表面受體或與細(xì)胞表面的靶抗原相結(jié)合后內(nèi)化 ,繼而在胞內(nèi)抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)合成 ,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡。毒素有很多種 ,如植物毒素、 細(xì)菌毒素、 動物毒素 , 其中引用zui廣泛的是植物毒素中的白喉毒素。美國 FDA已經(jīng)批準(zhǔn)了白喉毒素與白細(xì)胞介素 2 重組的免疫毒素 ONTAK(DAB3892I L2) ,用于治療人皮膚 T細(xì)胞淋巴瘤[13214 ]。

3. 3　 化學(xué)免疫偶聯(lián)物

單抗是藥物良好的靶向性載體 ,通過藥物分子上特殊的功能基團(tuán)如:羥基、 巰基、 氨基等 ,將治療藥物與單抗相連接而組成化學(xué)免疫偶聯(lián)物 ,避免了藥物對其他正常組織的毒害作用,選擇性地發(fā)揮治療作用。常與單抗進(jìn)行偶聯(lián)的藥物有阿霉素、 柔紅霉素、 平陽霉素、 博安霉素、 新制癌菌素、 氨甲喋呤等。

4　 單克隆抗體在其他疾病中的應(yīng)用

單克隆抗體藥物不只在腫瘤的治療中取得了很好療效 ,在其他疾病的治療中也取得了一些療效 ,例如:奧馬珠單抗(omalizumab)通過與游離 IgE結(jié)合而顯著降低游離 IgE的水平 ,阻斷 IgE與肥大細(xì)胞、 嗜堿粒細(xì)胞結(jié)合 ,防止炎癥介質(zhì)的釋放?？娠@著改善哮喘病人的癥狀、 肺功能及生活質(zhì)量 ,減少哮喘惡化的發(fā)作次數(shù) ,減少糖皮質(zhì)激素的用量 ,使用安全 ,具有很好的耐受性[15 ]。Mab03. 2C1C2 在體外能抑制白念珠菌芽管的形成 ,從而抑制白念珠菌對上皮細(xì)胞、 內(nèi)皮細(xì)胞的粘附 ,降低白念珠菌的侵襲力。利妥昔單抗對類風(fēng)濕和系統(tǒng)性紅斑狼瘡也有很好的治療作用。英夫利昔單抗對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者疼痛、 晨僵、 關(guān)節(jié)腫脹等臨床癥狀減輕程度就可達(dá)60 %。另有研究顯示 ,輸注英夫利昔單抗可快速、 顯著緩解頑固性銀屑病、 關(guān)節(jié)炎病人的關(guān)節(jié)和皮損癥狀[16 ]。英利昔單抗對克羅恩病、 潰瘍性結(jié)腸炎、 酒精性肝病等消化系統(tǒng)疾病都有較好療效 ,且在推薦的治療范圍內(nèi)安全性良好。

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