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關(guān)于ELISA試劑盒的包被方法

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2015年02月16日 17:30  

目前ELISA試劑盒做多的方式是采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液包被,4℃過液包被或者37℃包被2h,包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化,一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,要明確針對(duì)特定包被抗原的zui適包被濃度需要通過實(shí)驗(yàn)來確定。
聚本乙烯載體中加入定量的蛋白質(zhì)包被液后,多數(shù)放在4℃冰箱過液,ELISA試劑盒讓固相表面充分吸附,或用37℃孵育2h也可以達(dá)到同樣的吸附效果,但37℃包被2~3h與1h,兩者zui后測(cè)得的吸光度值相差不顯著。蛋白質(zhì)吸附于聚苯乙烯酶標(biāo)板的動(dòng)力學(xué)
研究表明:加入包被液后1MIN,固相上便發(fā)生吸附作用,吸附量與蛋白質(zhì)濃度,包被時(shí)間有關(guān)。ELISA試劑盒當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)濃度為5ug/mL時(shí),包被60MIN出現(xiàn)明顯吸附,12h后吸附量不再隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加:蛋白質(zhì)濃度為10ug/mL和20ug/mL時(shí),兩者的吸附作用類似,包被3min便出現(xiàn)明顯吸附,6h后吸附*,5min的吸附量為6min的30%

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