上海信帆生物提供的明膠酶譜法試劑盒(檢測(cè)MMP2/MMP9)包含了考馬斯亮藍(lán)染色液,不需額外購(gòu)買,該說明如下:
SDS-PAGE 凝膠蛋白質(zhì)考馬斯亮藍(lán)染色液說明書
常規(guī)考馬斯亮藍(lán) SDS-PAGE 凝膠蛋白質(zhì)染色是實(shí)驗(yàn)室常用的凝膠染色方法。銀染方法雖然靈敏度 高,但所需試劑復(fù)雜并且有毒有害,操作步驟繁瑣,難以控制獲得好的染色效果。
染色步驟:
1. 此染色液即為工作液,使用時(shí)直接將聚丙烯酰胺凝膠放在培養(yǎng)皿中以考馬斯亮藍(lán)染色液覆蓋凝 膠,并緩慢搖動(dòng) 2h;
2. 傾去染色液,用脫色液沖洗凝膠;
3. 以脫色液覆蓋凝膠,緩慢搖動(dòng) 2h,傾去脫色液,再加入新脫色液進(jìn)行脫色,直至獲得清晰的 藍(lán)色的條帶和干凈的背景(通常此過程需要 2~4h,也可脫色過一晚至清晰的藍(lán)色的條帶和干凈 的背景);
4. 對(duì)凝膠進(jìn)行分析和照相,凝膠可放置在 7%的乙酸中保存。也可用凝膠干膠裝置(P2000)對(duì) 凝膠進(jìn)行處理后保存。
安全性:含有甲醇,無(wú)特殊毒性,按一般化學(xué)品操作規(guī)程處理。
說明:
1. 染色液配方:0.25g 考馬斯亮藍(lán) R250+420ml 甲醇+100ml 冰乙酸,定容至 1000ml,混合 1h 后用 Whatman 1 號(hào)濾紙過濾,于室溫可無(wú)限期保存;
2. 脫色液配方:冰醋酸:甲醇:水=7:5:88(V:V:V);
3. 保存液:7%冰醋酸;
4. 凝膠染色之后,染色液可以回收利用,裝入新容器內(nèi),室溫或 4 oC 保存,可反復(fù)使用 2-4 次。
上海信帆生物代理銷售質(zhì)金屬蛋白酶MMP Zymography Assay Kit (for MMP-2 and MMP-9),現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎!
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