WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)基本過程

來源：上海信帆生物科技有限公司 2015年04月28日 09:30

　　1 、獲取細(xì)胞或組織裂解物

　　1）根據(jù)檢測(cè)蛋白的位置選擇合適的裂解buffer；

　　2）選擇合適的蛋白酶抑制劑，避免蛋白降解，從而保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

　　2 、蛋白定量

　　3 、電泳分離蛋白質(zhì)

　　4 、轉(zhuǎn)膜：根據(jù)不同的檢測(cè)目的和待測(cè)蛋白的特性,選擇合適的膜類型。

　　5 、封閉：去掉膜上多余的非特異性結(jié)合位點(diǎn)，降低背景。

　　6 、一抗孵育

　　一抗的選擇成功與否，是整個(gè)WB實(shí)驗(yàn)代測(cè)成功的關(guān)鍵，選擇一抗有以下幾個(gè)注意點(diǎn)：

　　1）選擇適合檢測(cè)標(biāo)本種屬的一抗；

　　2）選擇適用于WB實(shí)驗(yàn)方法的一抗；

　　3）選擇單克隆抗體或者經(jīng)過親和純化的多克隆抗體。

　　7 、二抗孵育：孵育條件一般為室溫1-2小時(shí)。

　　8 、底物孵育：選擇顯色或者化學(xué)發(fā)光底物。一般傾向于化學(xué)發(fā)光，靈敏度高且背景低，節(jié)省抗體用量。

　　9 、結(jié)果分析和檢測(cè)：凝膠成像系統(tǒng)檢測(cè)或者暗室曝光到膠片。

相關(guān)產(chǎn)品

凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。

国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影