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ELISA試劑盒在實驗中的步驟

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2015年05月18日 22:19  

ELISA試劑盒的實驗步驟
(1)使用前將所有試劑混勻,勿產(chǎn)生大量氣泡;
(2)取出所用板孔條數(shù),剩余封口放回4℃保存;
(3)加入稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品100?l于反應(yīng)孔內(nèi),加入待測樣品100?l于反應(yīng)孔內(nèi),蓋上模板,震蕩混勻,37℃孵育2h;
(4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,震蕩30秒,甩去孔內(nèi)液體,用吸水紙拍干,重復(fù)此操作5次;

(5)每孔加入100?l*抗體工作液,輕輕震蕩混勻,37℃孵育60分鐘;

(6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,震蕩30秒,甩去孔內(nèi)液體,用吸水紙拍干,重復(fù)此操作5次;
(7)每孔酶標(biāo)抗體工作液100?l, 輕輕震蕩混勻,37℃孵育30分鐘;
(8)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,震蕩30秒,甩去孔內(nèi)液體,用吸水紙拍干,重復(fù)此操作5次;
(9)每孔加入底物工作液100?l,震蕩混勻,37℃孵育15分鐘,避免光照;
(10)取出酶標(biāo)板,迅速加入100?l終止液,立即測定結(jié)果;
(11)在450nm波長處測定各孔的OD值

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