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酶免疫試驗之所以能成為臨床免疫檢驗中的主導(dǎo)技術(shù)，是與它的方法上的特異性和靈敏性、操作上的簡便性以及試劑的穩(wěn)定性分不開的，還有很重要的一點是，其對環(huán)境沒有污染威脅。
盡管如此，作為一項免疫檢驗技術(shù)，酶免疫試驗還是有其局限性的，不但所檢測的生物學(xué)體液樣本如血清中有可能存在各種干擾實驗的因素，而且在實驗過程中，影響結(jié)果的因素也很多，尤其是進(jìn)行手工的ELISA測定時。
此外，在定性ELISA測定中，陽性判定值（CUT-OFF）的建立，是在一定的統(tǒng)計學(xué)基礎(chǔ)上的，相對于某個具體的受檢者來說，其有可能并不具備正確性。例如，使用ELISA方法檢測抗HCV及抗HIV或HBsAg，有時候，檢測所得的陽性結(jié)也許并不是真正的陽性，而需要使用其他方法如重組免疫印跡（recombinant immunoblot as—say，RIBA）、蛋白印跡（Westernbl。t，WB）或中和試驗來確認(rèn)，才能報告陽性。這里抗HCV和抗HIV的檢測均使用病毒部分的基因工程抗原，其他一些病毒如流感病毒、腮腺炎病毒和水痘病毒等感染人體后，亦或一些自身抗體，也有可能會導(dǎo)致假陽性反應(yīng)。
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