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復蘇細胞注意事項

來源:生物試劑銷售中心   2015年06月18日 15:04  

復蘇細胞注意事項

1.  收到細胞后當天換液,全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,放進培養(yǎng)箱,第二天再消化。

2.  邊觀察邊消化,根據(jù)細胞的形態(tài),終止消化時間,采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣,

如可吹打下來,即終止消化。客戶摸索*消化時間。

3.  細胞有一份細胞操作說明書,請客戶仔細查看。

4.  記得加1%雙抗,降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,以備后用。

5.  售后時間為一周,于細胞本身的質(zhì)量問題,而因乙方自己不當操作(不規(guī)范操作,消化過度,不加雙抗導致的污染等)導致的細胞問題不在售后范疇。

6.  收到細胞后,如細胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,煩請當天盡快,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請您務必重視。

7.  剛收到細胞時,胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,利于細胞盡快恢復狀態(tài),細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,再調(diào)回10%即可。

目前國內(nèi)大多數(shù)細胞是會用常溫運輸一般3天左右問題不大,當然細胞收到后可以馬上檢查細胞狀態(tài),有什么問題及時細胞專家 王老師 ,如果細胞收到時密度70%-80%左右可以,收到后換液第二天消化;如果密度已經(jīng)90%以上  可以收到后馬上換液,然后放置培養(yǎng)箱靜置一段時間,四五個小時候再去消化細胞,但是細胞消化時候一定注意邊觀察邊消化,避免消化過度 ,胰酶首先在水浴鍋直接復溫到37度后加入細胞,然后每隔30秒 即吹打下細胞邊緣  如果能夠吹打散細胞 即可終止消化 吸走胰酶 用培養(yǎng)基把細胞打散后均勻接種,如果30秒吹打不下 再等30秒重復操作。分瓶不要分的太稀 分瓶后滿足細胞的貼壁率不低30% ,細胞的生長有密度依賴性 原始分瓶細胞密度很低的話 會造成細胞生長緩慢或者不長, 建議同等大小容器1;2或者1;3傳代 傳代周期三天左右。

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