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免疫熒光組織化學基本原理

來源:上海一研生物科技有限公司   2015年07月27日 13:39  


    免疫熒光組織化學(immunofluorescence histochemistry)或免疫熒光細胞化學(immunofluorescence cytochemistry)是將熒光作為標記物的免疫組織化學技術(shù)。1942年,Coons等報道用異硫氰酸熒光素(FITC)標記抗體,檢查小鼠組織切片中的可溶性肺炎球菌多糖抗原,從此開創(chuàng)了免疫熒光組織化學技術(shù)的先河。隨著熒光標記技術(shù)和單克隆抗體技術(shù)的不斷發(fā)展和激光掃描共聚焦顯微鏡的應用,使免疫熒光組織化學的特異性、快速性和在細胞、分子水平定位的敏感性與準確性大大提高。它能將生物樣品形態(tài)、功能和代謝密切結(jié)合,在細胞、亞細胞水平原位檢測抗原分子,這是其他任何生物技術(shù)難以取而代之的。故目前免疫熒光組織化學技術(shù)已成為生物學、基礎(chǔ)醫(yī)學和臨床醫(yī)學各學科領(lǐng)域常用研究方法之一。
 
    免疫 熒光組織化學技術(shù)是用免疫熒光技術(shù)檢測細胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)的方法。根據(jù)抗原抗體反應原理,先將已知抗體(或抗原)標記熒光素制成熒光標記物,再用這種熒光標記物作為分子探針與組織細胞內(nèi)的相應抗原(或抗體)反應,在細胞或組織中形成含有熒光素的特異性抗原抗體復合物,這種復合物上的熒光素受激發(fā)光照射而發(fā)出各種顏色熒光,利用熒光顯微鏡觀察,即可對組織細胞中的抗原或抗體進行定性、定位乃至定量研究。

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