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NK-92細胞培養(yǎng)說明

來源:生物試劑銷售中心   2015年07月29日 18:08  

NK-92細胞

NK-92細胞;中文名稱:人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞

General Information:

Organism:

Homo sapiens, human

Tissue:

peripheral blood

Culture Properties:

Suspension,multicell aggregates

Morphology:

lymphoblast

Biosafety Level:

2


Culture Method:

Complete Growth Medium:

MEMα(Gibco11900-024)+10%FBS+100-200U/ml IL-2+P/S

Culture Conditions:

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Temperature: 37°C

Subculturing:

Cultures can be maintained by the addition of fresh medium or replacement of medium. Alternatively, cultures can be established by centrifugation with subsequent resuspension at 2 to 3×105 viable cells/mL. Do not allow cell concentration to exceed 1×106 cells/mL.NK-92 cells are extremely sensitive to overgrowth and media exhaustion.

Medium Renewal: Every 2 to 3 days

Cryopreservation:

Freeze medium: Complete growth medium supplemented with 5% (v/v) DMSO

Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

注意事項:

  1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們,:.
  2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。
  3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置4-6h,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
  4. 懸浮細胞可將細胞懸液收集,離心后用6~8mL培養(yǎng)基重懸細胞,放入細胞瓶內(nèi)培養(yǎng)。待細胞匯合度達80%左右再分瓶培養(yǎng)。
  5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
  6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和Procell技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員.跟蹤回訪直至問題解決。
  7. 該細胞只可用于科研。

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