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免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些?上海心語(yǔ)生物科技有限公司技術(shù)李給您幾點(diǎn)建議:
1、抗體濃度和質(zhì)量問(wèn)題以及抗體來(lái)源選擇錯(cuò)誤。不知抗體是進(jìn)口的還是國(guó)產(chǎn)的工作液，怎么這么高稀釋度也沒(méi)能做出陽(yáng)性結(jié)果?另外，不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng)，必須摸索*濃度。
2、抗原修復(fù)不全，對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來(lái)打開(kāi)抗原表位，以利于與抗體結(jié)合;建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試。有人做過(guò)實(shí)驗(yàn)，這是*的時(shí)間和次數(shù)。若不行，還可高壓修復(fù)。
3、組織切片本身這種抗原含量低;
4、血清封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
5、DAB孵育時(shí)間過(guò)短。
6、細(xì)胞通透不全，抗體未能充分進(jìn)入胞內(nèi)參與反應(yīng)。
7、開(kāi)始做免疫組化，我建議你一定要首先做個(gè)陽(yáng)性對(duì)照片，排除抗體等外的方法問(wèn)題。
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