1.二抗與組織中的Ig結(jié)合
如羊抗兔的二抗,二抗可以標(biāo)本中(人)Ig發(fā)生交叉反應(yīng),科學(xué)上越接近的動(dòng)物,交叉反應(yīng)越明顯,如人與猴,兔與豚鼠。抗體
避免方法:用與待測(cè)組織相同的5%的正常血清稀釋二抗。如人血清。
組織中殘存醛基與Ig的結(jié)合
如醛類(lèi)固定后未能*的沖洗,殘留醛基可以和Ig結(jié)合。
2.避免方法:
(1)*沖洗;
(2)0.02%的新鮮的硼氧化鉀液處理10分鐘后沖洗。
3.內(nèi)源性過(guò)氧化物酶
紅細(xì)胞,粒細(xì)胞的含量尤其高,鏡下可以識(shí)別,不要將其當(dāng)成陽(yáng)性結(jié)果。
避免方法:
(1)石蠟切片 0.3%雙氧水-甲醇溶液處理切片;
(2)冰凍切片 3%雙氧水處理切片5分鐘(99:1)因?yàn)槲唇?jīng)固定包埋,大部分酶未被破壞;
(3)對(duì)于骨髓涂片 用非過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體
4.內(nèi)源性生物素
以 24mg/ml的卵白素封片15分鐘。
5.交叉反應(yīng)
PcAb敏感性高,但特異性稍低,容易出現(xiàn)非特異性染色。
避免方法:
(1)盡可能稀釋抗體;
(2)盡可能用McAb。
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