介紹一種質粒轉化大腸桿菌時免熱激及孵育的方法。

    背景：目前外源質粒轉化大腸桿菌的步驟，需要先將質粒和感受態(tài)細胞在冰上撫育半小時，然后42度熱激90秒，加液體培養(yǎng)基緩搖1個小時左右再離心涂板。其中熱激步驟溫度和時間要求嚴格，熱激后大量菌細胞死亡，還要經(jīng)過液體培養(yǎng)基撫育才能涂板。

   方法改進：我們可以在做質粒和感受態(tài)細胞在冰上撫育的同時，將要涂的平板放在37度培養(yǎng)箱里，當撫育結束后，立即涂到已經(jīng)加熱到37度的平板上，利用培養(yǎng)板的熱度代替熱激，平板可以直接放回培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)。由于溫度相對溫和，細胞死亡的少，之后的液體培養(yǎng)基撫育過程也省掉了。

    這個方法我們一直在用，質?？梢猿晒D進菌體中，只要感受態(tài)細胞沒有問題，其轉化率和使用熱激法差不多，而且若是新鮮制備的感受態(tài)細胞，轉化率甚至更高?？梢允∠?2度水浴裝置的儀器，還節(jié)省了至少1個小時的時間。