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培養(yǎng)細胞株傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長細胞如COS-7、CHO等用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞如PC12用直接吹打即可傳代。
一、用品
(1) 0.25％胰蛋白酶，全培養(yǎng)液
(2) 滴管，離心管，培養(yǎng)瓶(皿)，培養(yǎng)瓶蓋，注射器，計數6
二、步驟
(1) 貼壁細胞的消化法傳代：
?、? 吸除瓶內舊培養(yǎng)液。
?、? 以50ml培養(yǎng)瓶為例，向瓶內加入2-3ml胰蛋白酶，輕輕搖動培養(yǎng)瓶，使消化液流遍所有細胞表面。
?、? 消化在37C或室溫25C以上環(huán)境下進行。消化后把培養(yǎng)瓶放置顯微鏡下進行觀察．發(fā)現胞質回縮、細胞間隙增大后。應立即終止消比，然后吸掉消化液后再加全培養(yǎng)液終止消化。
?、? 用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，反復吹打瓶壁細胞，吹打過程要順序進行，從培養(yǎng)瓶底的一端開始到另一端結束，以保證所有的底部都被吹到。吹打動作要輕柔同時盡可能不要出現泡沫。這些都對細胞有損傷。細胞脫離瓶壁后形成細胞懸液。
?、? 計數，分別接種在新的培養(yǎng)瓶內。
部分貼壁生長細胞，不經消化處理直接吹打也可使細胞從瓶壁脫落下來，而進行傳代。但這種方法于部分貼壁不牢的細胞，如Hela、PC12細胞等。直接吹打對細胞損傷較大，細胞常也有較大數目的丟失，因而絕大部分貼壁生長的細胞均需消化后，才能吹打傳代。
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