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構(gòu)建穩(wěn)定的細(xì)胞株，通常有二種方法：一是脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染后，單克隆篩選穩(wěn)定細(xì)胞株。二是應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒，慢病毒轉(zhuǎn)染，篩選穩(wěn)定細(xì)胞株。
脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染：在轉(zhuǎn)染24小時后，消化細(xì)胞并計數(shù)。將細(xì)胞種到96孔板，保證每個孔2-3個細(xì)胞，這樣才能得到單克隆。待細(xì)胞貼壁后，加入抗生素篩選。篩選時間和濃度視細(xì)胞而定。一般G418一個星期作用，嘌呤霉素2-3天。脂質(zhì)體法篩單克隆時間較長，且效率低，大概只有1%。
病毒轉(zhuǎn)染：先要用包裝細(xì)胞，一般為293細(xì)胞，包裝出病毒，再用病毒轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞。包裝病毒視不同類型的病毒而定，一般要3-5天的時間。包裝好的病毒要測滴度，根據(jù)滴度決定轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞的病毒量。轉(zhuǎn)染目的細(xì)胞1-2天后加抗生素篩選得到穩(wěn)定細(xì)胞株。病毒轉(zhuǎn)染得到穩(wěn)定細(xì)胞株的效率高，只是步驟繁瑣。
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