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細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程

來源:上海極威生物科技有限公司   2015年11月04日 20:45  

(請嚴格遵照無菌操作)

1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3

 ml0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?/SPAN>

1-2min)

2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消

化到細胞漂?。┤サ粢让福?~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞

層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)?培

養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞

密度達到80%以后重復1項操作或者凍存

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