在一步法測定中，當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，免疫組化試劑盒此時反應(yīng)后顯色的吸光值與標(biāo)準(zhǔn)曲線某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測讀，所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量，因此在使用一步法試劑測定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)時，應(yīng)注意可測范圍的zui高值。

    用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。我們要求檢驗(yàn)結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格 時，將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。 酶標(biāo)比色儀簡稱酶標(biāo)儀，通常指于測讀ELISA試劑盒研發(fā)結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多免疫組化試劑盒研發(fā)公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。

    酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有：測讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、線性等等。這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)，因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時，免疫組化試劑盒供應(yīng)商反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。