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移植后細(xì)胞的存活

來(lái)源:研域生物技術(shù)(上海)有限公司   2016年03月14日 09:51  

研究結(jié)果對(duì)指導(dǎo)我們下一步把研究結(jié)果推向臨床應(yīng)用有積極的作用,并對(duì)干細(xì)胞治療其他疾病和走上臨床應(yīng)用提ELISA試劑盒供了有益的借鑒。
本研究中,我們以脂肪來(lái)源的干細(xì)胞(ADSCs)作為供體細(xì)胞,利用RCS大鼠為視網(wǎng)膜變性的模型,開(kāi)展了視網(wǎng)膜下腔移植干預(yù)治療研究。ADSCs來(lái)自臨床經(jīng)知情同意后患者廢棄的脂肪組織并經(jīng)過(guò)必要的分離純化,并在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)ADSCs的干預(yù)效果進(jìn)行臨床判定,包括ERG檢查確認(rèn)細(xì)胞移植對(duì)大鼠視功能的改善情況。本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人 S100B蛋白(S-100B)水平。用純化的人S100B蛋白(S-100B)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入  S100B蛋白(S-100B),ELISA試劑盒再與 HRP標(biāo)記的  S100B蛋白(S-100B)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的     S100B蛋白(S-100B)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人   S100B蛋白(S-100B)濃度。

同時(shí),對(duì)移植后細(xì)胞的存活、遷移、組織整合、細(xì)胞分化、細(xì)胞因子分泌等指標(biāo)及其對(duì)視網(wǎng)膜組織和細(xì)胞影響進(jìn)行判定。結(jié)果表明,ELISA試劑盒ADSCs對(duì)RCS大鼠視網(wǎng)膜有明顯的保護(hù)作用并對(duì)其視功能有支持和重建作用。同時(shí),對(duì)ADSCs治療視網(wǎng)膜變性作用的機(jī)制進(jìn)行了分析探討。

 

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