ELISA試劑盒不同的指示劑在不同的酸堿環(huán)境下呈現(xiàn)不同的顏色。
指示劑的分類
1、酸堿指示劑。指示溶液中H+濃度的變化，是一種有機(jī)弱酸或有機(jī)弱堿，其酸性和堿性具有不同的顏色。指示劑酸HIn在溶液中的離解常數(shù)Ka=[H+][In-]/[HIn]，即溶液的顏色決定于[In-]/[HIn]，而[In-]/[HIn]又決定于[H+]。以甲基橙（Ka=10-3.4）為例，溶液的pH<3.1時(shí)，呈酸性，具紅色；pH>4.4時(shí)，呈堿性，具黃色；而在pH3.1～4.4，則出現(xiàn)紅黃的混合色橙色，稱之為指示劑的變色范圍。不同的酸堿指示劑有不同的變色范圍。
2、金屬指示劑。絡(luò)合滴定法所用的指示劑，大多是染料，它在一定pH下能與金屬離子絡(luò)合呈現(xiàn)一種與游離指示劑*不同的顏色而指示終點(diǎn)。
3、楊Hau還原至實(shí)際。為氧化劑或還原劑，它的氧化形與還原形具有不同的顏色，在滴定中被氧化（或還原）時(shí)，即變色，指示出溶液電位的變化。
4、沉淀滴定指示劑。主要是Ag+與鹵素離子的滴定，以絡(luò)酸鉀、鐵銨礬或熒光黃作指示劑。
常見指示劑的變色范圍
石蕊                變色范圍       PH5.8——8.0         由紅色變?yōu)樗{(lán)色
甲基橙              變色范圍       PH3.1——4.4         由紅色變?yōu)辄S色
酚酞                變色范圍       PH8.2——10.0        由無色變?yōu)榧t色
甲基紅              變色范圍       PH4.4——6.2         由紅色變?yōu)辄S色
溴百里酚藍(lán)          變色范圍       PH6.2——7.6         由黃色變?yōu)樗{(lán)色
用以指示滴定終點(diǎn)的試劑。在各類滴定過程中，隨著滴定劑的加入，被滴定物質(zhì)和滴定劑的濃度都在不斷變化，在等當(dāng)點(diǎn)附近，離子濃度會(huì)發(fā)生較大變化，能夠?qū)@種離子濃度變化作出顯示（如改變?nèi)芤侯伾?，生成沉淀等）的試劑就叫指示劑?br />ELISA試劑盒