文章標題：NS-1細胞

關(guān)鍵詞：NS-1細胞培養(yǎng)，NS-1細胞價格，來源背景，特征特性，染色鑒定

中文名稱：小鼠骨髓瘤細胞系

生長狀態(tài)：貼壁生長

在正常細胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細胞發(fā)生凋亡早期，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。在細胞發(fā)生凋亡時，膜磷脂酰絲氨酸外翻的發(fā)生早于細胞核的變化，而此時Propidium Iodide（PI）不能通過細胞膜。

細胞壞死時，雖然也會發(fā)生磷脂酰絲氨酸外翻，但此時細胞膜的通透性明顯增加，PI等核酸染料進入細胞與細胞核中的核酸結(jié)合，發(fā)出紅色熒光。所以Annexin V-FITC(綠色熒光)常與鑒定細胞死活的核酸染料（如PI）合并使用，來區(qū)分凋亡細胞與死亡細胞。

技術(shù)原理及步驟

1. 離心收集細胞，微量離心機轉(zhuǎn)速1000 rpm，離心時間5 min，棄培養(yǎng)基。

2. 用冷PBS洗滌細胞兩次。

3. 用400 μL1× Binding Buffer懸浮細胞，濃度大約為1×106 cells/mL。

4. 在細胞懸浮液中加入5 μlLAnnexin V-FITC，輕輕混勻后于2~8°C避光條件下孵育15min。

5. 加入10 μL PI后輕輕混勻于2~8°C避光條件下孵育5 min。

6. 在1小時內(nèi)用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測。

應(yīng)用實例

應(yīng)用領(lǐng)域

細胞的早期凋亡及區(qū)分凋亡與壞死細胞

服務(wù)周期

我公司在正式接受實驗委托2個星期左右完成實驗并提供實驗報告。

客戶須知（對材料的要求、注意事項）

需提供細胞類型，處理條件。

細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。

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