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淋巴細(xì)胞功能測(cè)定同時(shí)減少副作用新技術(shù)

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2016年05月03日 23:12  

淋巴細(xì)胞功能測(cè)定同時(shí)減少副作用新技術(shù)
根據(jù)對(duì)體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)的激發(fā)不同,可以把淋巴細(xì)胞功能檢測(cè)的方法大致分為兩大類:抗原特異性和多克隆性。只有以前接觸過抗原的個(gè)體的細(xì)胞,才能被激發(fā)出針對(duì)特異性抗原的陽(yáng)性反應(yīng),但所有正常個(gè)體的細(xì)胞,都可被激發(fā)出多克隆活性因子的陽(yáng)性反應(yīng)。可用抗原,也可用多克隆活性物作激活物,陽(yáng)性反應(yīng)表明反應(yīng)所需的細(xì)胞反應(yīng)和細(xì)胞因子都以合適的比例出現(xiàn)。
抗原特異性遲發(fā)性過敏反應(yīng),即針對(duì)記憶抗原的T淋巴細(xì)胞反應(yīng),可以通過下列方法常規(guī)檢測(cè)。梯度離心,從外周血中獲得單核細(xì)胞,將單核細(xì)胞與培養(yǎng)孔內(nèi)不同濃度的檢測(cè)抗原結(jié)合,該培養(yǎng)孔中含生長(zhǎng)基質(zhì)和固定量的細(xì)胞。在免疫的個(gè)體中,T淋巴細(xì)胞識(shí)別已被處理的抗原,經(jīng)激活的巨噬細(xì)胞產(chǎn)物白細(xì)胞介素-1和T淋巴細(xì)胞分泌的生長(zhǎng)因子白細(xì)胞介素-2的誘導(dǎo),T淋巴細(xì)胞發(fā)生增殖。88在培養(yǎng)基中加入放射性核素標(biāo)記的脫氧核糖核酸(DNA)(3H-胸腺嘧啶脫氧核苷),就可以檢測(cè)激活的T淋巴細(xì)胞的增殖。通過測(cè)定放射性核素與細(xì)胞內(nèi)DNA的結(jié)合,可以確定增殖反應(yīng)的量。與只含培養(yǎng)基不含抗原的培養(yǎng)孔的細(xì)胞相比,含抗原的培養(yǎng)孔中生長(zhǎng)的細(xì)胞內(nèi)DNA結(jié)合的3H-胸腺嘧啶脫氧核苷增加,表明反應(yīng)呈陽(yáng)性。不同的免疫個(gè)體,增殖反應(yīng)的程度不同。增殖反應(yīng)取決于好幾個(gè)因素,包括體內(nèi)接觸抗原后,過去的時(shí)間,個(gè)體的年齡和抗原的化學(xué)特征。
某些常見抗原(如白色念珠菌和用于誘導(dǎo)特異性免疫的抗原,如破傷風(fēng)毒素。)對(duì)評(píng)價(jià)個(gè)體產(chǎn)生遲發(fā)性過敏反應(yīng)的整體功能是有用的。體內(nèi)對(duì)這些抗原無反應(yīng),表明有T細(xì)胞參與的細(xì)胞介導(dǎo)的免疫缺陷。其他在環(huán)境中不常見的抗原,在評(píng)價(jià)免疫缺陷的作用或某些疾病狀態(tài)時(shí)的特異性遲發(fā)過敏反應(yīng)也有用。例如,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在某些復(fù)發(fā)彌漫性組織胞漿菌病的病人體內(nèi)缺乏對(duì)組織胞漿菌素抗原的遲發(fā)性過敏反應(yīng)。已有人提到,該異常反映了宿主免疫反應(yīng)已獲缺陷,而宿主免疫反應(yīng)在允許莢膜組織胞漿菌體內(nèi)生長(zhǎng)中起重要作用。
多克隆激活因子,也叫有絲分裂原,它通過結(jié)合細(xì)胞膜糖蛋白的碳?xì)洳糠郑T導(dǎo)淋巴細(xì)胞的增殖。許多常用的多克隆激活因子取自植物提取物,被稱為植物凝集素。不同的植物凝集素以不同的程度刺激不同的淋巴細(xì)胞亞群。臨床實(shí)驗(yàn)室zui常用的是刀豆球蛋白A(con A)和植物血細(xì)胞凝集素(PHA),它們都能很顯著地刺激T淋巴細(xì)胞。還有美洲商陸有絲分裂原,在有巨噬細(xì)胞出現(xiàn)的情況下,它能刺激培養(yǎng)的T和B細(xì)胞。美洲商陸有絲分裂原也叫T細(xì)胞依賴性B細(xì)胞有絲分裂原。

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