分光光度計波長準(zhǔn)確度和波長重復(fù)性是分光光度計重要的技術(shù)指標(biāo),每年至少要進(jìn)行一次檢定測試。鐠銣玻璃是分光光度計波長準(zhǔn)確度和重復(fù)性檢定常用的檢具之一,每一片鐠銣玻璃都附有標(biāo)準(zhǔn)的波長值,通過實際測量分光光度計波長值,并拿測量值減去標(biāo)準(zhǔn)值,得出該臺分光光度計波長準(zhǔn)度值,從而判斷該臺儀器是否合格。
實驗程序:在分光光度計整個波長范圍內(nèi)按每大約100 nm左右選擇一個波長點選用透射比方式,以空氣作參比測量氧化鈥玻璃的吸收峰波長。單方向?qū)γ恳唤M譜線(或吸收峰)按波長順序依次測量,測量三次,每個波長三次測量值的平均值與參考波長標(biāo)稱值之差為單波長誤差,單波長誤差中的大值為波長準(zhǔn)確度;每個波長三次測量值的大值與小值之差為單波長重復(fù)性,所有單波長重復(fù)性之中的大值為儀器的波長重復(fù)性。
實驗方法:
非自動掃描型分光光度計
1)選取儀器透射比測量模式,
2)波長調(diào)整到標(biāo)準(zhǔn)波長前3個nm處,
3)用空氣作空白調(diào)整儀器透射比為100%
4)把鐠銣玻璃濾光片放入樣品架內(nèi)第二個槽里面,(*個槽為參比槽);
5)然后將鐠銣玻璃濾光片拉入光路中,并記錄此時透射比的讀數(shù);
6)往高波長處調(diào)整0.1-0.5nm波長值(波長準(zhǔn)確度在±2nm的調(diào)整0.5nm; 波長準(zhǔn)確度在±1nm的調(diào)整0.2nm;波長準(zhǔn)確度在±0.5nm的調(diào)整0.1nm).
7)重復(fù)步驟3)-5)直致測量出相對小透過率,即為該波長處的實測波長值。
8)重復(fù)測量三次大波長值-小波長值即為波長重復(fù)性。
自動掃描型分光光度計
1)測試波長范圍設(shè)置為230-650nm,掃描間距(采樣間距)為0.1nm,掃描速度為低俗,測量模式為透過率;
2)對空氣校準(zhǔn)儀器空白;
3)把鐠銣玻璃濾光片放入樣品架內(nèi)第二個槽里面,(*個槽為參比槽)
4)掃描
5)檢索并記錄透光率小峰值
6)重復(fù)測量三次大波長值-小波長值即為波長重復(fù)性。
實驗程序:在分光光度計整個波長范圍內(nèi)按每大約100 nm左右選擇一個波長點選用透射比方式,以空氣作參比測量氧化鈥玻璃的吸收峰波長。單方向?qū)γ恳唤M譜線(或吸收峰)按波長順序依次測量,測量三次,每個波長三次測量值的平均值與參考波長標(biāo)稱值之差為單波長誤差,單波長誤差中的大值為波長準(zhǔn)確度;每個波長三次測量值的大值與小值之差為單波長重復(fù)性,所有單波長重復(fù)性之中的大值為儀器的波長重復(fù)性。
實驗方法:
非自動掃描型分光光度計
1)選取儀器透射比測量模式,
2)波長調(diào)整到標(biāo)準(zhǔn)波長前3個nm處,
3)用空氣作空白調(diào)整儀器透射比為100%
4)把鐠銣玻璃濾光片放入樣品架內(nèi)第二個槽里面,(*個槽為參比槽);
5)然后將鐠銣玻璃濾光片拉入光路中,并記錄此時透射比的讀數(shù);
6)往高波長處調(diào)整0.1-0.5nm波長值(波長準(zhǔn)確度在±2nm的調(diào)整0.5nm; 波長準(zhǔn)確度在±1nm的調(diào)整0.2nm;波長準(zhǔn)確度在±0.5nm的調(diào)整0.1nm).
7)重復(fù)步驟3)-5)直致測量出相對小透過率,即為該波長處的實測波長值。
8)重復(fù)測量三次大波長值-小波長值即為波長重復(fù)性。
自動掃描型分光光度計
1)測試波長范圍設(shè)置為230-650nm,掃描間距(采樣間距)為0.1nm,掃描速度為低俗,測量模式為透過率;
2)對空氣校準(zhǔn)儀器空白;
3)把鐠銣玻璃濾光片放入樣品架內(nèi)第二個槽里面,(*個槽為參比槽)
4)掃描
5)檢索并記錄透光率小峰值
6)重復(fù)測量三次大波長值-小波長值即為波長重復(fù)性。
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