YIJI一步法PCR反應液產(chǎn)品說明書（中文版）

主要用途

YIJI一步法PCR反應液是一種旨在方便、快速地進行各種復雜基因組模板，小片斷DNA，保真度要求高，擴增有難度的DNA擴增的一步反應體系。廣泛運用在SAGE和數(shù)字化染色體基因型*分析等前沿技術。產(chǎn)品即到即用，無核酶污染，性能穩(wěn)定，操作方便迅速，擴增產(chǎn)量高，效果滿意，質量保證。

技術背景

該反應液經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的熱啟動高保真PCR反應體系。靈敏度、特異性、穩(wěn)定性優(yōu)勢明顯，無需調整鎂離子濃度，無需擔心擴增質量，無需擔心反應失敗。擴增產(chǎn)量高，質量優(yōu)異。特別是擴增后續(xù)的有效操作，例如質粒克隆、DNA連接、測序等，效果堪稱同類產(chǎn)品*。

產(chǎn)品內容

YIJI反應液（Reagent A）                                     600微升
YIJI補充液（Reagent B）                                       1毫升
產(chǎn)品說明書                                                   1份

保存方式

保存在-20℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

引物：用于擴增反應的引導分子
PCR管：用于樣品操作的容器
PCR儀：用于PCR反應

實驗提示

1．一次反應總量為50微升
2．移取30微升YIJI反應液（Reagent A）到0.5毫升PCR管
3．加入用戶自備的引物A和B（分別總量為350納克）
4．加入待測的DNA模板（100納克）
5．加入YIJI補充液（Reagent B）到總量50微升
6．放進4℃微型臺式離心機離心5秒
7．使用1000微升槍頭加入2滴礦物油（注意：參見注意事項4）
8．放進PCR儀
9．PCR反應程序為：

溫度（℃）    時間    循環(huán)
95    2分鐘    1
95
Tm用戶設定溫度（50－62）
72    30秒
1分鐘
30秒    
35
72    5分鐘    1
10．PCR產(chǎn)物置于－20℃冰箱里保存，直到進行任何后續(xù)實驗
11．進行瓊脂糖凝膠電泳分析

注意事項

1．本產(chǎn)品為20次操作
2．建議整個操作在4℃下進行
3．建議使用潔凈的PCR管和帶有濾芯的槍頭，以免污染
4．根據(jù)用戶PCR儀的性能，決定是否加入礦物油（Mineral Oil）
5．配制完成后，即刻進行擴增反應，以確保反應物的活性
6．根據(jù)Tm=4（G+C）+2（A+T）公式確定Tm溫度；建議使用分析軟件。用戶可以測試*Tm溫度。擴增片段3kb以上可以增加Tm時間到2分鐘
7．對于基因組DNA的擴增，其循環(huán)延長時間為30秒至3分鐘，即小于500bp－30秒；小于2kb－1分鐘；大于2kb，每增加1kb，增加1分鐘
8．避免反復凍融
9．本公司提供PCR系列產(chǎn)品

質量標準
1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無核酶污染
3．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定反應產(chǎn)量高
訂購信息

單組分訂購信息

編號                    名稱                                            規(guī)格        
YJ20008.2            YIJI一步法PCR反應液                        20次
YJ20008.2A            YIJI反應液（Reagent A）                        600微升
YJ20008.2B            YIJI補充液（Reagent B）                        1毫升

其它成分訂購信息

產(chǎn)品編號    名稱    規(guī)格
YJ12008.1    10倍PCR*緩沖液    100次
YJ12008.2    一步法PCR反應液    100次
YJ12008.3    超白金TAG DNA聚合酶    200 U
YJ12008.4    三磷酸脫氧核糖核苷酸（dNTPs）混合液    2.5/10mM：毫升
YJ12008.5    一步法平端PCR反應液    100次
YJ12113    一步法熒光定量PCR反應液    100次
YJ20024.2    基因甲基化特異性PCR擴增（MSP）試劑盒    60次