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液相色譜柱zui常用的色譜柱填充劑為化學(xué)鍵合硅膠，反相色譜系統(tǒng)使用非極性填充劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠zui為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠(如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等)也有使用。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統(tǒng)使用離子交換填充劑;分子排阻色譜系統(tǒng)使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑;對映異構(gòu)體的分離通常使用手性填充劑。
液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時, 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
液相色譜柱使用注意事項：
1、色譜柱的柱效和保護(hù)柱：拿到一根新柱時，一定要先看其使說明，然后測柱效，定期檢測柱效， 保留在新色譜柱上得到的色譜圖，并記錄條件， 定期檢測儀器的譜帶展寬。 若應(yīng)用于在線監(jiān)測， 應(yīng)對色譜柱提供在線的物理保護(hù)和化學(xué)保護(hù)。
2、色譜柱的清洗：對所做的樣品要有充分的了解，用對該樣品洗脫能力zui強(qiáng)的流動相清洗，每種色譜柱有特定的清洗方法，一定要看其使用說明。
3、色譜柱的存放：存放前除去雜質(zhì)和鹽，采用合適的存放溶劑，避免色譜柱床的干枯，避免機(jī)械振動，防止細(xì)菌生長，注意存放的溫度。
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