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神奇濾布的產(chǎn)品詳細(xì)說(shuō)明
神奇濾布Miracloth。Miracloth其實(shí)是Calbiochem公司的眾多經(jīng)典產(chǎn)品中很不起眼的一個(gè)，是一種孔徑為22－25微米的聚酯人造纖維濾布，除了可以用于分離原生質(zhì)體、細(xì)胞勻漿過(guò)濾、核酸純化等等，還有一些有趣的用途。
基因工程轉(zhuǎn)化真菌和一些土壤細(xì)菌時(shí)，往往需要先消化掉厚厚的細(xì)胞壁，制備分離原生質(zhì)體以便進(jìn)行轉(zhuǎn)化，即使是大家很熟悉的酵母轉(zhuǎn)化，當(dāng)簡(jiǎn)便的醋酸鋰方法不起作用時(shí)，原始也是有效方法還是原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化。當(dāng)經(jīng)過(guò)消化處理的菌體混合液經(jīng)過(guò)神奇濾布過(guò)濾后，就可以去掉未被消化*的菌體和雜質(zhì)，分離得到的“裸露的”原生質(zhì)體就可以準(zhǔn)備進(jìn)行轉(zhuǎn)化或者電轉(zhuǎn)了。如果沒(méi)有這一步的分離，未*消化的菌體由于生長(zhǎng)迅速，會(huì)嚴(yán)重干擾結(jié)果。
植物基因組純化相對(duì)比較麻煩一點(diǎn)，市面上有不少試劑盒可供選擇，多數(shù)純化基因組DNA的試劑盒采用快速離心方法，其純化產(chǎn)物大小僅為50kb左右。你可能沒(méi)有想到，一種改良的Miracloth快速純化方法是另一種經(jīng)濟(jì)有效的選擇：通過(guò)液氮研磨得到的組織經(jīng)過(guò)裂解液處理，溫浴、醋酸鉀冰浴復(fù)性，用神奇濾布過(guò)濾，得到的濾液可以直接用異丙醇沉淀。這個(gè)方法改良于玉米基因組純化，特別適合各種植物組織DNA的純化。大的優(yōu)點(diǎn)是快速經(jīng)濟(jì)實(shí)用，不需要昂貴的試劑盒或者試劑，整個(gè)方法就像用試劑盒一樣簡(jiǎn)單。
如果需要植物組織的高分子量基因組就不宜采用試劑盒。神奇濾布是另外一個(gè)好選擇--植物組織勻漿后直接用Miracloth過(guò)濾就可以得到含有細(xì)胞核的溶液，離心沉淀細(xì)胞核，后繼的高分子量基因組抽提就簡(jiǎn)單易行了。此外，這個(gè)方法還可以用于制備研究轉(zhuǎn)錄因子所用的細(xì)胞核抽提物(Cell Nucleic Extract)，甚分離純化線粒體DNA、細(xì)胞膜等等。
其實(shí)神奇濾布就是簡(jiǎn)單的一種微孔濾膜，比干酪布好用得多。只要你想得到，就有比產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)更廣泛而有趣的用途。比如有人用在植物真菌培養(yǎng)，甚還有人用在抗體細(xì)胞培養(yǎng)中。
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