以下是關于?人轉鐵蛋白受體(TFR/CD71) ELISA試劑盒?的實驗使用說明書綜合指南，整合了多個高可信度來源的操作要點和注意事項?：

　　BS-1497 人轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理?

　　采用雙抗體夾心法：

　　包被抗體?：微孔板預包被抗人TFR/CD71抗體?。

　　結合反應?：依次加入樣本、標準品和HRP標記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-酶標抗體”復合物?。

　　顯色檢測?：TMB底物在HRP催化下顯色(藍色→黃色)，顏色深度與TFR濃度正相關，450nm波長測OD值?。

　　二、試劑盒組成?

　　預包被微孔板

　　TFR標準品(濃度范圍通常為15.63–1000 pg/mL)?

　　HRP標記檢測抗體、TMB底物、終止液

　　洗滌緩沖液(20×濃縮液需稀釋)?

　　封板膜(一次性使用)?

　　三、樣本處理?

　　血清/血漿?：離心(3000×g，10分鐘)去除顆粒，避免溶血?。

　　細胞上清/組織勻漿?：離心(1000–3000×g，10分鐘)取上清?。

　　保存?：分裝后-20℃凍存，避免反復凍融?。

　　四、操作步驟?

　　平衡試劑?：冷藏試劑需室溫平衡15–30分鐘?。

　　加樣?：

　　標準品和樣本建議做復孔?。

　　高濃度樣本需稀釋(計算時乘以稀釋倍數(shù))?。

　　孵育?：37℃避光反應，嚴格計時(通常30–60分鐘)?。

　　洗滌?：使用洗板機或手動洗板，拍干?。

　　顯色與終止?：

　　加入TMB避光顯色(10–15分鐘)?。

　　終止后30分鐘內(nèi)檢測OD值?。

　　五、注意事項?

　　質(zhì)量控制?：每次實驗需同步繪制標準曲線?。

　　避免污染?：

　　使用一次性槍頭，不同批號試劑勿混用?。

　　封板膜不可重復使用?。

　　儀器校準?：定期校驗移液器精度(誤差≤2%)?。

　　安全處理?：所有廢棄物按生物危害物處置?。

　　六、常見問題?

　　洗滌液結晶?：溫水浴助溶，不影響效果?。

　　顯色異常?：檢查底物避光保存及HRP活性?。

　　注：以上資料僅供參考，如需進一步技術支持，可聯(lián)系供應商獲取服務或實驗指導?。

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